Caracterização da resposta SOS de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni

• Processo: 11/11591-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Paulo Lee Ho
• Beneficiário: Luciane Schons da Fonseca
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 10/51365-0 - Contribuição ao conhecimento de Leptospira interrogans serovar Copenhageni utilizando a informação genômica, AP.TEM
• Assunto(s): Leptospira interrogans Reparo do DNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Leptospira | lexA | reparo de DNA | resposta SOS | Reparo de DNA e Biologia Molecular de Leptospira

Resumo

Leptospira interrogans é o agente etiológico da leptospirose, uma doença disseminada por todo o mundo. Roedores podem liberar a bactéria na urina por toda a vida, e as leptospiras presentes na água podem infectar os humanos através de abrasões na pele. O patógeno pode interagir com agentes danificadores de DNA tanto no meio ambiente quanto em seus hospedeiros. O principal mecanismo que procariotos utilizam para lidar com danos em seu DNA é o sistema SOS, regulado por LexA. Apesar da importância desse sistema, pouco de seu funcionamento é conhecido nas Leptospiras. O objetivo desse trabalho é caracterizar o sistema SOS de L. interrogans serovar Copenhageni. Diversos genes comumente encontrados sob controle de LexA em outros organismos foram selecionados e seus níveis de expressão foram investigados por qPCR antes e depois do tratamento com radiação UV-C. A análise dos dados revelou alguns transcritos com níveis de expressão aumentados após o tratamento, como recA, recN, lexA1, dinP, sulA e ssb2. Surpreendentemente, nenhum gene dos sistemas uvr e ruv tiveram alteração na expressão. Além disso, determinamos que lexA1 é expresso na forma de operon com outros 7 genes, ao contrário do descrito para essa região. Também mostramos a existência de um segundo gene lexA, lexA2, adquirido pelo sorovar Copenhageni por transferência horizontal. Esse gene também responde à UV-C, e possivelmente codifica uma proteína com capacidade de ligação ao DNA e de autoclivagem. Esses resultados sugerem que L. interrogans possui uma resposta complexa a danos no seu material genético, porém distinta de outros organismos já descritos. Assim, a próxima etapa do projeto consistirá na determinação experimental da ligação de LexA1 e/ou LexA2 às regiões promotoras dos genes regulados positivamente por UV-C, além de caracterizar o funcionamento das proteínas através de ensaios in vitro e in vivo. Também faremos análises de ativação dos promotores por ensaios de gene repórter e comparação da expressão gênica de cepas selvagens e mutantes lexA. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

FONSECA, Luciane Schons da. Caracterização da resposta SOS em Leptospira interrogans sorovar Copenhageni. 2015. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.