Anticorpos IgY identificadores de câncer ovariano: produção e validação: estudo piloto

• Processo: 11/18791-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2011
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunoquímica
• Pesquisador responsável: Wilmar Dias da Silva
• Beneficiário: Ângela Alice Amadeu Megale
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 11/50005-3 - Anticorpos IgY identificadores de câncer ovariano: produção e validação: estudo piloto, AP.R
• Assunto(s): Peptídeos Neoplasias ovarianas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpos IgY | Câncer ovariano | peptídeos | Imunoquímica

Resumo

Dois peptídeos, Pep.NPIIbA#1 e Pep.NPIIbB#2, foram delineados da proteína 2b-(NaPi2b) transportadora de fosfato dependente de sódio e ligados covalentemente a transportador imunologicamente compatível. Transportador - peptídeos foram usados para imunizar galinhas poedeiras. Anticorpos IgY foram purificados das gemas de ovos, quantificados por ELISA e peptídeos ligados ao transportador identificados por Western blot. O método desenvolvido permite produzir anticorpos IgY monoespecíficos, de títulos elevados, de alta atividade específica e de baixo custo tanto anti-Pep.NPIIbA#1 como Pep.NPIIbB#2. O uso de galinhas foi aprovado pelo "Comitê de Ética em Pesquisa com Animais""Centro de Biociências e Biotecnologia - Universidade Estadual do Norte Fluminense - Darcy Ribeiro". Esta proposta visa a validação dos anticorpos IgY desenvolvidos como identificadores de marcadores de câncer de ovário humano. Mulheres, pacientes com diagnóstico definido de câncer de ovário e normais serão selecionadas. Antes de serem incluídas no protocolo serão informadas dos objetivos da proposta, solicitadas lerem o documento de auto-consentimento e, caso concordem, solicitadas a assiná-lo. Amostras de sangue serão coletadas por processos de rotina, duplamente identificadas, com dados de registro do hospital e código, a presença de marcadores de câncer de ovário pesquisada em ensaios paralelos usando anticorpos IgY anti-peptídeos e o anticorpo monoclonal OC-125 anti CA 125, uma glicoproteína. Validação inclui os seguintes estágios: 1) Determinação da adequabilidade dos anticorpos IgY anti-peptídeos como identificadores; 2) Otimização e padronização do protocolo e dos reagentes; 3) Avaliação do desempenho dos reagentese do protocolo; 4) Monitoramento contínuo do desempenho; e, 5) Manutenção e aprimoramento dos critérios de validação ao longo dos testes de rotina. Este estudo foi aprovado pelo "Comitê de Ética em Pesquisas Médicas" do Instituto do Câncer do Estado de São Paulo. (AU)