Caracterização estrutural e análises funcionais do transportador de Nitrato/Nitrito do tipo ABC de Xanthomonas axonopodis pv. citri

• Processo: 11/22386-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2012
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Andrea Balan Fernandes
• Beneficiário: Aline Sampaio Cremonesi
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Bioquímica Cancro (doença de planta)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cancro cítrico | Cristalografia de raio-x | Transporte transmembrana | Bioquímica

Resumo

Xanthomonas citri é uma bactéria aeróbica, patógena, causadora do cancro cítrico, uma doença de citros que leva à perdas econômicas significativas no Brasil e no mundo. 4% do genoma desta bactéria corresponde à genes de transportadores do tipo ABC, uma das maiores famílias de proteínas, envolvidas com diferentes funções incluindo desde o transporte, nutrição, reparação de DNA até o fenômeno de resistência múltiplas à drogas. Dada a importância e envolvimento destes transportadores na fisiologia dos organismos, os mesmos podem ser usados como excelentes alvos para o desenvolvimento de inibidores do crescimento bacteriano. Apesar de sua importância, a relação destes transportadores com os mecanismos de infecção e patogênese em X. citri ainda não estão definidos. Neste contexto, este projeto visa caracterizar estrutural e funcionalmente os componentes do transportador do tipo ABC de nitrato/nitrito e taurina, codificado pelo operon nitTnrtBCD. Uma vez que o nitrato é a maior fonte de nitrogênio para organismos e que seu transporte é extremamente necessário, acreditamos que o transportador identificado tenha uma importância significativa para a bactéria. Estudos preliminares realizados com um mutante de X. citri portador de deleção no gene nitT, que codifica a proteína ligadora periplasmática, apontam um papel fundamental desta proteína no crescimento e infecção bacteriana. Pretende-se caracterizar estruturalmente todos os componentes deste transportador por espectroscopia, cristalografia e modelagem molecular, definindo as regiões de interação proteína-ligante e proteína-proteína, de forma a estabelecer possíveis alvos para o desenvolvimento de inibidores. Funcionalmente, as análises serão baseadas na construção de mutantes de deleção dos genes dos transportador e avaliação do comportamento dos mesmos em ensaios in vitro em diferentes condições de cultivo e in vivo, durante a infecção na planta.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SAMPAIO, ALINE; PEGOS, VANESSA RODRIGUES; OSHIRO, ELISA EMIKO; BALAN, ANDREA. The periplasmic binding protein NrtT affects xantham gum production and pathogenesis in Xanthomonas citri. FEBS OPEN BIO, v. 7, n. 10, p. 1499-1514, OCT 2017. (13/09172-9, 11/22386-2, 11/20468-1)

CREMONESI, ALINE SAMPAIO; DE LA TORRE, LILIA I.; DE SOUZA, MAXIMILLIA FRAZAO; MUNIZ, GABRIEL S. VIGNOLI; LAMY, M. TERESA; OLIVEIRA, CRISTIANO LUIS PINTO; BALAN, ANDREA. The citrus plant pathogen Xanthomonas citri has a dual polyamine-binding protein. BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS REPORTS, v. 28, DEC 2021. (14/50983-3, 11/22386-2)