Padronização de uma nova técnica para detecção de anticorpos neutralizantes anti-dengue baseada na RT-PCR em tempo real.

• Processo: 12/11522-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2013
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Benedito Antônio Lopes da Fonseca
• Beneficiário: Ana Luisa Pereira Feitosa
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 11/22514-0 - Estudo das características virais, genéticas e imunológicas do hospedeiro humano no desenvolvimento de apresentações assintomáticas e graves da dengue, AP.R
• Assunto(s): Dengue Reação em cadeia da polimerase em tempo real Neutralização
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dengue | formação de foco | neutralização | RT-PCR em tempo real | Transcrição in vitro | Moléstias Infecciosas eTropicais

Resumo

Por representar a mais importante arbovirose em nível mundial, as infecções causadas pelos vírus da dengue são de grande importância em nosso país, apresentando uma ampla variedade de sintomas clínicos que vão desde infecção assintomática até formas mais graves da doença. O título de anticorpos neutralizantes produzidos frente à infecção por dengue parece ser determinante na forma de apresentação da doença no paciente. Atualmente, a forma com que o teste de neutralização é realizado, demanda tempo e não se tem muitos parâmetros sobre a sensibilidade do mesmo. O objetivo deste projeto é padronizar um ensaio de neutralização viral por RT-PCR em tempo real em cepas virais dos quatro sorotipos, como um método para avaliação da fisiopatologia da doença e posteriormente avaliar a eficácia dessa metodologia em soros de pacientes. Serão construídas curvas padrões para cada sorotipo viral, por meio de ensaio formação de foco e transcrição in vitro do RNA viral, que serão comparadas e verificadas por RT-PCR em tempo real quanto à sensibilidade. Após padronização, amostras de pacientes previamente triadas para os sorotipos virais serão então testadas e o título de anticorpos neutralizantes determinados. O ensaio de neutralização será importante na avaliação do desenvolvimento das formas graves da doença e avaliação da eficácia de vacinação nos pacientes em estudos futuros.