Segregação cromossômica em Xanthomonas citri subsp. citri

• Processo: 12/09252-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2012
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade
• Pesquisador responsável: Henrique Ferreira
• Beneficiário: Amanda Piovesan Ucci
• Supervisor: Patrick H. Viollier
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Université de Genève, Suíça
• Vinculado à bolsa: 10/02041-8 - Segregação cromossômica em Xanthomonas citri subsp. citri, BP.DR
• Assunto(s): Divisão celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cancro cítrico | centromero bacteriano | Divisão Celular | perda de virulencia | fitopatologia

Resumo

Dados recentes de pesquisa em nosso grupo (auxílio pesquisa processo FAPESP 2010/05099-7 e bolsa de doutorado 2010/02041-8) apontam para a atuação de ParB no processo de segregação cromossômica de Xanthomonas citri (Xac) e, além disto, percebemos haver algumas semelhanças fenotípicas entre o sistema de segregação-divisão celular de nosso modelo bacteriano e o de Caulobacter crescentus (favor ver draft do artigo em elaboração em ANEXO). Se nossas suspeitas estiverem corretas, Xac poderá apresentar um sistema de controle de septação em divisão celular semelhante ao de C. crescentus, onde um fator ainda não identificado em nosso modelo, se associaria a ParB para controlar o sítio de montagem do anel Z. Este fator, que em C. crescentus é chamado MipZ, tem por função inibir a polimerização de FtsZ em locais que não no centro de uma célula em divisão e sua função depende do homólogo de ParB nesta bactéria. MipZ em C. crescentus é codificada por uma ORF que mostra semelhanças com parA; Xac também possui ORFs que mostram alguma semelhança com parA e para as quais não existe ainda função definitiva atribuída. Para que possamos desvendar a existência de um sistema de segregação-divisão semelhante ao de C. crescentus em Xac, faz-se necessário construir mutantes desta bactéria para as ORFs tipo parA anotadas em seu genoma e averiguar se alguma delas teria função relacionada a MipZ. Posteriormente, pretendemos analisar a influencia de proteínas do tipo ParA codificadas por Xac na função de ParB. Isto será realizado mediante observação de mutantes expressando diferentes combinações de ParAB em fusão ou não com GFP por microscopia de fluorescência e suas diversas variações metodológicas. Gostaríamos ainda de identificar experimentalmente os sítios alvo de interação de ParB no DNA de Xac e avaliar a influência de proteínas do tipo ParA nesta interação. Para tal, empregaremos a técnica de sequenciamento em larga escala seguida de experimentos de ChIP-seq. Tais métodos fornecerão subsídios para entendermos as funções e inter-relações de proteínas Par em Xac. Esta nova frente que se abre é de extrema relevância para o tema, não só por sua biologia, mas pelo fato de que estamos nos deparando com um sistema que se perturbado altera o padrão de virulência de Xac (este dado é inédito e estamos neste momento preparando um artigo para submissão; em anexo). (AU)