Suporte técnico para produção de proteínas recombinantes em larga escala

• Processo: 13/20706-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Luis Eduardo Soares Netto
• Beneficiário: Adriele dos Santos
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 07/58147-6 - Aspectos biológicos de tióis: estrutura protéica, defesa antioxidante, sinalização e estados redox, AP.TEM
• Assunto(s): Escherichia coli Proteínas recombinantes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Escherichia coli | Estrutura | expressão | Proteinas recombinantes | proteinas

Resumo

Vários anos após os primeiros sequenciamentos de genomas (10 anos após o sequenciamento do genoma humano) muitos esforços têm sido efetuados no campo da genômica funcional, já que vários desafios foram lançados no sentido de compreender modo de ação de genes. Um importante aspecto de genômica funcional é a elucidação de estruturas proteicas. Nesse sentido, nosso grupo de pesquisa ingressou na Rede de Biologia Molecular Estrutural (SMolBNet) foi organizada pelo Centro de Biologia Molecular Estrutural (CeBiMe), do Laboratório Nacional de Luz Sincronton (LNLS) que conta suporte financeiro da FAPESP. O LNLS é um centro de pesquisas do governo federal que é mantido com recursos públicos do CNPq e Ministério de Ciência e Tecnologia. O SMolBNet contou com 16 grupos científicos, com uso de técnicas de Cristalografia de Raios-X e de Ressonância Magnética Nuclear. O meu grupo de pesquisa foi um dos 16 grupos do SMOLBNET e teve um desempenho destacado. Resolvemos estruturas de várias proteínas e o desafio continua sendo relacionar essas informações com outros aspectos da atividade biológica de enzimas estudadas em meu laboratório. Para a determinação de estruturas proteicas é importante a obtenção de grandes quantidades de proteínas puras. No momento, o meu grupo já está em condições de obter grandes quantidades de várias proteínas com alto grau de pureza. Além disso, meu grupo continua construindo vetores para expressar outras proteínas de Xylella fastidiosa e Saccharomyces cerevisiae em grande quantidade. Portanto, cada vez mais se torna importante um suporte técnico para atividades como o cultivo de microrganismos; a purificação de proteínas e ensaios de cristalização e modelagem de proteínas. É importante ressaltar que meu grupo de pesquisa foi responsável por depositar pela primeira vez as coordenadas atômicas de uma proteína de Xylella fastidiosa (1ZB8 e 1ZB9), primeiro organismo que teve seu genoma sequenciado por um consórcio brasileiro. Recentemente, foi publicado o primeiro artigo descrevendo características estruturais e funcionais dessa proteína (Oliveira e col., J. Mol Biol., 359(2):433-45 2006). Posteriormente, outros estudos relacionando dados estruturais com atividades de proteínas com propriedades REDOX foram publicados (Discola e col., J. Mol Biol., 2009; Horta e col., J Biol Chem. 2010; Oliveira e col., Biochemistry 2010, Oliveria e col., 2012). Além disso, vários projetos contemplados no projeto temático 07/58147-6 demandam grandes quantidades de proteínas como cristalização e análises cinéticas. (AU)