Produção biotecnológica de L- asparaginase (ASP1) de Saccharomyces cerevisiae em sistema de expressão heterólogo Pichia pastoris

• Processo: 13/14494-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2014
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2015
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Adalberto Pessoa Junior
• Beneficiário: Bruna de Souza Divino
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Microbiologia aplicada L-asparaginase Proliferação celular Fermentação Leucemia-linfoma linfoblástico de células precursoras Pichia pastoris
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Asp1 | cerevisiae | fermentação | L-asparaginase | Pichia pastoris | S | Microbiologia Aplicada

Resumo

Utilizada amplamente no tratamento de Leucemias Linfoblásticas Agudas, a L-Asparaginase é uma enzima que atua diminuindo a concentração de asparagina livre no plasma. Dessa forma, impede a proliferação de células malignas, visto que tais células, ao contrário das células saudáveis, não conseguem sintetizar o aminoácido asparagina que necessitam para a síntese proteica por não possuírem a asparagina sintetase devido a um silenciamento genético. A L-Asparaginase utilizada atualmente no Brasil é importada e de bactéria, o que gera problemas com custo e abastecimento, além de causar algumas alergias aos usuários. Isso nos incentiva a encontrar formas de produzir tal enzima de forma menos onerosa para um fácil acesso e, se possível, com menor potencial alérgico. Para isso, será estudada a produção biotecnológica de L-Asparaginase de levedura em sistema de expressão heterólogo Pichia pastoris. O objetivo é obter uma cepa de P. pastoris que expresse a isoforma de L-Asparaginase extracelularmente para facilitar o processo de purificação industrial. Dessa forma, será realizada a clonagem do gene sintético (ASP1), com códons otimizados para expressão em P. pastoris, e a otimização da produção de L-Asparaginase em shaker utilizando um planejamento experimental com as variáveis: pH, temperatura, concentração do substrato (glicerol), concentração do inóculo, concentração do indutor e tempo de indução. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

DIVINO, Bruna de Souza. Produção biotecnológica de L-asparaginase (ASP1) de Saccharomyces cerevisiae em sistema de expressão heterólogo Pichia pastoris. 2015. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.