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Triagem funcional da atividade biológica do adenovírus AdCDKN2Airesp53 usando Gaussia luciferase

Processo: 14/12322-5
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2014
Data de Término da vigência: 30 de junho de 2015
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Bryan Eric Strauss
Beneficiário:Juliana Goulart Xande
Instituição Sede: Instituto do Câncer do Estado de São Paulo Octavio Frias de Oliveira (ICESP). Coordenadoria de Serviços de Saúde (CSS). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Neoplasias   Genes p53   Proteína supressora de tumor p53   Mutação   Terapia genética   Morte celular   Adenovirus
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:câncer | cell based assay | morte celular | p53 | terapia genica | vetores virais | vetores virais

Resumo

O gene supressor de tumor p53 tem liderado os estudos clínicos que aplicam a tecnologia de transferência gênica para o tratamento do câncer. p53 tem efetivo potencial terapêutico, contudo p53 nem sempre atinge uma boa eficácia terapêutica em todos os tumores, uma possível explicação é que a presença de mutante de p53 nas células tumorais pode afetar a resposta terapêutica ao tratamento com p53 selvagem exógeno. Em um cenário ideal uma nova droga (como os vetores-p53) deve ser analisada frente ao maior número possível de "situações" clínicas antes da transdução para pacientes, como é o caso de mutação no gene p53. Cell based assays estão na trincheira do processo de triagem de compostos com potencial farmacológico, são acessíveis e direcionam os testes pré-clínicos em modelos animais. Utilizaremos dois conjuntos de linhagens isogênicas geradas com os mutantes dominantes negativos p53R175 e p53R248, para investigar a sensibilidade terapêutica dos vetores-p53, como AdCDKN2AIRESp53. Nós vamos introduzir cell based assays dependentes da atividade da naturalmente secretada Gaussia luciferase (GLUC), para monitorar viabilidade celular e apoptose em tempo real de modo não invasivo nas diferentes linhagens tratadas com AdCDKN2AIRESp53. Este sistema sensor facilita a transdução dos resultados experimentais em aplicação clínica. Inicialmente, porque são transponíveis para modelos animais acelerando a avaliação pré-clínica de protocolos terapêuticos quando a dose, esquema de administração e eficácia na combinação de terapias.

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