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Implementação de banco de dados de cepas de Leptospira sp. por MALDI-TOF-MS e análise da atividade de suas proteases secretadas

Processo: 14/18451-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de novembro de 2014
Vigência (Término): 31 de outubro de 2015
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
Pesquisador responsável:Maria Aparecida Juliano
Beneficiário:Daniel Karcher
Instituição-sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:12/50191-4 - Síntese, estudo cinético e aplicações de substratos e inibidores de enzimas proteolíticas, AP.TEM
Assunto(s):Enzimas proteolíticas   Espectrometria de massas   Inibidores enzimáticos   Peptídeo hidrolases

Resumo

A espectrometria de massa (MS) por ionização/dessorção a laser assistida por matriz (MALDI) - tempo de voo (TOF), MALDI-TOF-MS, desponta entre as principais técnicas para identificação rápida de bactérias, por não requerer sequências de DNA e proteína de referência. Com a reemergência da doença em regiões não endêmicas, a leptospirose é vista agora como uma doença global. As manifestações clínicas da doença são diversas, das mais suaves, ou até evoluir para doença sistêmica grave, a síndrome de Weil, podendo levar a morte. Quase todos os mamíferos podem ser portadores de Leptospiras. Entre os fatores de virulência, a secreção de proteases pode contribuir para a colonização do hospedeiro. As proteases auxiliam em funções vitais de microrganismos infecciosos, como replicação e processamento. Os laboratórios coordenandos pela Profa. Dra Maria Aparecida Juliano participaram de estudos de metaloproteases como fator de virulência em Leptospiras e a questão que se coloca agora é verificar o quanto os espectros de referência (ER) da coleção de Leptospiras se correlacionam com a patogenicidade e as atividades proteolíticas. Para tanto implementaremos uma biblioteca de ER gerada por MALDI-TOF-MS baseada na coleção de Leptospiras da Faculdade de Medicina Veterinária da USP e estudaremos a atividade proteolítica de proteases secretadas por 10 de suas cepas utilizando peptídeos FRET. (AU)