Efeito de crotalfina sobre culturas celulares agregantes de cérebro de rato

• Processo: 14/24245-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Geral
• Pesquisador responsável: Yara Cury
• Beneficiário: Cesar Manuel Remuzgo Ruiz
• Supervisor: Florianne Tschudi-Monnet
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Université de Lausanne (UNIL), Suíça
• Vinculado à bolsa: 11/09333-7 - Crotalfina: análogos fluorescentes e estudo de seu mecanismo de ação em culturas e co-culturas de neurônios e queratinócitos, BP.PD
• Assunto(s): Neuroinflamação Cultura de células Cérebro Crotalfina Crotalus durissus terrificus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aggregating brain cell cultures | Alternative to non-animal testing | Demyelination | neuroinflammation | Neuroprotective action | Remyelination | Dor e Inflamação

Resumo

A crotalfina é um peptídeo de 14 aminoácidos isolado do veneno de Crotalus durissus terrificus "cascavel" que desencadeia antinocicepção de longa duração (3-5 dias) mediada pelos receptores kappa-opioides (modelos de dor aguda) ou kappa- e delta-opioides (modelos de dor crônica). A crotalfina induz a ativação dos receptores kappa-opioides e canabinoides CB2 com local liberação de dinorfina A como foi observado nos tecidos da pata. A ativação dos receptores kappa-opioides depende da ativação dos receptores canabinoides CB2 periféricos. Em ratas sensibilizadas com PGE2, a crotalfina incrementa a ativação de proteíno-quinases ativadas por mitógeno (MAPK) sendo este processo dependente da ativação de proteíno-quinases C ¾ (PKC ¾). Por outro lado, estudos realizados com macrófagos peritoneais residentes e estimulados com LPS indicaram que a crotalfina inibe a fagocitose, a liberação de H2O2 e a produção de óxido nítrico. Ainda, a crotalfina incrementa a secreção de IL-1², modula a secreção de IL-6 e inibe a secreção de TNF±. As culturas celulares agregantes de cérebro são culturas primárias tridimensionais de flutuação livre obtidos de cérebros de embriões de ratos que mostram os mesmos tipos celulares encontrados neste órgão tais como células-tronco e progenitoras neurais, neurônios, glias (astrócitos, oligodendrócitos e micróglias), retém a capacidade de sofrer interações célula-célula e amadurecimento histotípico durante o tempo de cultura (até vários meses). Devido a estas características, as culturas celulares agregantes de cérebro têm sido usadas com sucesso na avaliação de neurotoxicidade aguda e subcrônica, desmielinização, processos hipoglicêmicos e patogênicos relacionados a isquemia, em neuroinflamação e modelos neurodegenerativos. Estudos recentes indicaram que os receptores canabinoides CB2 participam na atividade neuroprotetora através de suas ações anti-inflamatórias. O objetivo do presente estudo é avaliar o efeito da crotalfina sobre as culturas celulares agregantes de cérebro investigando seu efeito sobre algum tipo celular específico e analisando se a crotalfina pode ter um potencial efeito anti-inflamatório, pode prevenir a desmielinização induzida por IFN-³ e LPS, ou pode promover a remielinização após este processo. (AU)