Deleção de genes envolvidos na via de secreção de proteínas em Aspergillus nidulans

• Processo: 15/00660-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 20 de agosto de 2015
• Data de Término da vigência: 19 de junho de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: André Ricardo de Lima Damasio
• Beneficiário: Mariane Paludetti Zubieta
• Supervisor: Rolf Alexander Prade
• Instituição Sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Campinas , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Oklahoma State University, Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 14/15403-6 - Aspergillus nidulans como modelo para manipulação de genes envolvidos no processo de "Unfolded Protein Response", BP.DR
• Assunto(s): Resposta a proteínas não dobradas Retículo endoplasmático Aspergillus nidulans
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aspergillus nidulans | endoplasmic reticulum | genes deletion | proteins folding | proteins secretion | Unfolded Protein Response | Melhoramento de cepas

Resumo

Em eucariotos, unfolded protein response (UPR) regula positivamente genes responsáveis por restaurar a homeostase no retículo endoplasmático (RE) durante o acúmulo de proteínas desenoveladas ou enoveladas incorretamente. Condições que sobrecarregam o RE com estas proteínas, incluem estresses ambientais, alterações no estado redox do RE, e a expressão de proteínas heterólogas em sistemas biológicos como fungos filamentosos. Os genes envolvidos em UPR foram previamente estudados e utilizados como ferramenta para aumentar a secreção de proteínas em sistemas heterólogos, no entanto o número de resultados é limitado. Devido à complexa rede regulatória envolvida em UPR, pode ser difícil selecionar genes alvo adequados para o melhoramento da via secretora. Em células fúngicas, UPR regula muitos genes que estão envolvidos em vários processos, tais como a via de secreção, glicosilação, ERAD (Endoplasmic-Reticulum-Associated Protein Degradation) e enovelamento de proteínas. Portanto, o objetivo central deste projeto é deletar genes relacionados a UPR, cuidadosamente selecionados a partir de dados de RNA seq, em Aspergillus nidulans e observar o efeito destas deleções sobre os níveis de secreção de proteínas heterólogas. Os dados de RNAseq foram obtidos a partir do cultivo de A. nidulans na presença de reagentes que induzem stress de RE como tunicamicina (Tm) e ditiotreitol (DTT). (AU)