Padronização de western blots para IP3Rs, proteínas de peso molecular elevado

• Processo: 15/10897-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2015
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Alexandre Hiroaki Kihara
• Beneficiário: Victor Allisson da Silva
• Instituição Sede: Centro de Matemática, Computação e Cognição (CMCC). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 14/16711-6 - Relação entre acoplamento celular e microRNAs no desenvolvimento, adaptação e degeneração do sistema nervoso, AP.R
• Assunto(s): Neurociências Membrana plasmática Cálcio Cálcio intracelular Inositol 1,4,5-trisfosfato Western blotting
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cálcio | Ip3R | Western blot | Neurociências

Resumo

O cálcio (Ca2+) intracelular tem papel fundamental na manutenção da regulação de diversos processos no organismo, desde o tráfico de moléculas na membrana, transmissão sináptica, secreção, motilidade, excitabilidade da membrana, expressão gênica, divisão celular e apoptose até a aprendizagem e memória. Porém, o elevado influxo de cálcio (Ca2+) e o aumento da concentração do íon intracelular livre com subsequente ativação de enzimas pode ser um fator determinante para o agravamento do dano neuronal após lesões. A concentração intracelular de cálcio pode ser aumentada de forma transitória por dois mecanismos principais: influxo de cálcio por canais permeáveis na membrana plasmática e mobilização e liberação de estoques intracelulares de cálcio. O inositol 1,4,5-trifosfato (IP3) é um segundo mensageiro que se difunde no citoplasma, ligando-se ao receptor (IP3R) que é um canal de Ca2+ intracelular localizado principalmente na membrana do reticulo endoplasmático (ER). Ao entrar na região do ER, o IP3 mobiliza o Ca2+ dos estoques, liberando-o para o citoplasma. Os IP3R são homotetrâmeros constituídos por subunidades que apresentam 313, 307 e 304kDa, correspondente aos subtipos 1, 2 e 3 respectivamente. As isoformas dos receptores de IP3 possuem pesos moleculares elevados, o que dificulta a quantificação por western blot. Este projeto de Treinamento Técnico está vinculado ao Projeto Jovem Pesquisador Relação entre acoplamento celular e microRNAs no desenvolvimento, adaptação e degeneração do sistema nervoso, processo 2014/16711-6. (AU)