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Implantação de um modelo in vitro de avaliação da permeabilidade vascular para estudos da patogênese da dengue hemorrágica e triagem de compostos com potencial terapêutico

Processo: 15/16396-6
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2015
Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2016
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia
Pesquisador responsável:Ester Cerdeira Sabino
Beneficiário:Giovanna Regina Chicolli
Instituição Sede: Instituto de Medicina Tropical de São Paulo (IMT). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:13/01690-0 - Implantação de um modelo in vitro de avaliação da permeabilidade vascular para estudos da patogênese da dengue hemorrágica e triagem de compostos com potencial terapêutico, AP.R
Assunto(s):Virologia   Vírus da dengue   Dengue grave   Monócitos   Células endoteliais   Etiologia   Permeabilidade capilar
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:células endoteliais | Dengue hemorrágica | monócitos | permeabilidade vascular in vitro | Vírus da Dengue | Virologia

Resumo

A patogênese da dengue hemorrágica (DH) é complexa e multifatorial, envolvendo fatores virais e do hospedeiro. Além disso, a escassez de modelos animais que representem satisfatoriamente a fisiopatologia da dengue em humanos limita os avanços no entendimento dos mecanismos da DH e dificulta o desenvolvimento de fármacos para o tratamento da dengue. Sendo assim, este projeto visa a implantação de um sistema in vitro de co-cultura de células endoteliais e monócitos infectados pelo DENV para estudar os fatores envolvidos no extravasamento vascular e possíveis fármacos que possam inibir este processo. As células endoteliais serão cultivadas sobre insertos de membranas microporosas dispostos em placas de cultura gerando dois compartimentos, apical e basolateral. Neste sistema, culturas de monócitos infectados pelo DENV produzirão citocinas que quando em contato com as células endoteliais irão interferir com a permeabilidade vascular in vitro, semelhantemente ao que ocorre in vivo. Através da adição de dextrana fluorescente no lado apical e medição da sua transferência para o lado basolateral a permeabilidade vascular será calculada. Desta maneira, será possível fazer a triagem de compostos com potencial terapêutico na dengue, estudar a interferência na permeabilidade vascular por diferentes isolados clínicos do DENV e avaliar o perfil de produção de citocinas em reposta a infecção para melhor entender os fatores que interferem na patogenia da DH. (AU)

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