Papel do ômega-3 ou 6 na morte celular induzida por cininas na lesão por isquemia e reperfusão em fígados de ratos

• Processo: 16/03049-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2016
• Data de Término da vigência: 04 de fevereiro de 2018
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: Márcia Regina Nagaoka
• Beneficiário: Gianlucca Nadas Damiani
• Instituição Sede: Instituto de Saúde e Sociedade (ISS). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Baixada Santista. Santos , SP, Brasil
• Assunto(s): Gastroenterologia Isquemia Fígado Reperfusão Apoptose Necrose Morte celular Modelos animais Técnicas histológicas Western blotting
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: apoptose | fígado | isquemia | necrose | reperfusão | Hepatologia

Resumo

Existem diversas situações que podem causar isquemia em um órgão, com falta ou diminuição do fluxo sanguíneo e do aporte de oxigênio e nutrientes. A lesão por isquemia e reperfusão (IRI) é o fenômeno de acentuação do dano celular em órgão isquêmico, depois do restabelecimento do fluxo. O conhecimento dos mecanismos deste dano é de grande interesse, já que participam da fisiopatologia de inúmeras situações clínicas, inclusive do transplante hepático, sendo que esta lesão pode dificultar ou impedir a adaptação do enxerto (10 a 30% dos casos) ou, na pior das possibilidades, causar disfunção imediata (até 5%). Verificamos que a IRI em fígados de rato é caracterizada por dois processos de morte celular, sendo um evento inicial de necrose das células endoteliais sinusoidais, seguida de uma fase tardia com apoptose dos hepatócitos. Trabalhos recentes relacionam a IRI com a suplementação com os ácidos graxos essenciais, representados por componentes das famílias ômega-3 (É-3) e ômega-6 (É-6), que são importantes para o crescimento e desenvolvimento do organismo, possuindo papel chave na prevenção de doenças coronárias, hipertensão, artrite, câncer e outras condições inflamatórias e auto-imunes. Uma possível relação entre esses dois fatores é a produção de eicosanoides por essas duas famílias, moléculas muito ativas durante a resposta inflamatória, evento-chave na IRI. Outro importante modulador do fígado, relacionado com a IRI é o sistema das cininas, representado principalmente pela bradicinina (BK). As ações biológicas e os efeitos farmacológicos da BK são mediados por dois receptores, um constitutivo (B2R) e outro induzido (B1R). O principal agonista do B1R é des-Arg9-BK (DABK) e, este receptor está ausente em tecidos normais, sendo que sua expressão pode ser induzida por estímulo inflamatório. Recentemente, estudos em nosso laboratório confirmaram a expressão do B1R após IRI hepática e, além disso, um antagonista desse receptor, a des-Arg9[Leu8]-BK diminuiu a morte celular por apoptose, aparentemente sem diminuir a atividade da caspase-3. Já o antagonista do B2R, HOE-140, foi capaz de diminuir a morte celular por necrose. O papel do sistema cinina na IRI hepática é pouco estudado e o objetivo deste projeto é estudar a morte celular induzida por cininas na isquemia e reperfusão de fígados de ratos previamente (8 semanas) alimentados com dieta rica em ômega-3 ou ômega-6. A morte celular será avaliada por análise histológica (azul de Tripan), ELISA, dosagem enzimática das caspases e Western Blot de outras proteínas relacionadas à apoptose (Bad, Bax e Bcl-2). Espera-se com este projeto entender melhor o processo da morte celular na IRI e com isso melhorar a qualidade do fígado a ser transplantado e consequente sobrevida do receptor.