Construção de promotores sintéticos para expressão de celulases usando novos elementos cis-regulatórios em Trichoderma reesei

• Processo: 16/01946-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2016
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Rafael Silva Rocha
• Beneficiário: Leonardo Martins Santana
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 12/22921-8 - Abordagens de biologia sintética para decifrar os mecanismos de integração de sinais em promotores bacterianos complexos, AP.JP
• Assunto(s): Regulação da expressão gênica Biologia sintética
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia Sintetica | Promoteres sintéticos | Regulação gênica | Biologia Sintética

Resumo

O estudo de microrganismos produtores de enzimas lignocelulolíticas para degradação da biomassa vegetal possuem um alto interesse biotecnológico para a geração de produtos industriais de alto valor agregado. Nesse sentido, o fungo Trichoderma reesei se destaca como grande produtor de celulases e hemicelulases e é objeto de estudos para a criação de ferramentas de engenharia genética que propiciem seu melhoramento para novos processos. Nesse organismo, a ação de fatores de transcrição que controlam a expressão de genes de celulases e hemicelulases vem sendo amplamente estudada. Esta regulação está ligada à interação dos fatores de transcrição com regiões específicas dos promotores destes genes, os chamados elementos cis-regulatórios. O presente plano de trabalho visa a construção de promotores sintéticos através da identificação computacional e caracterização funcional de elementos cis-regulatórios relacionados à regulação da expressão de genes envolvidos na degradação da biomassa vegetal. Para tal, ensaios de validação serão realizados mediante a análise das cinéticas de expressão dos promotores de celulases fusionados à GFP via integração cromossômica em T. reesei. Do mesmo modo, promotores sintéticos serão construídos utilizando-se novos elementos cis-regulatórios identificados e seus comportamentos caracterizados. Os objetivos propostos deverão contribuir para um aumento nos conhecimentos acerca dos mecanismos moleculares de regulação transcricional em T. reesei. Além disso, espera-se o desenvolvimento de novas ferramentas de manipulação genética de T. reesei para aplicações biotecnológicas.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

LUÍSA CZAMANSKI NORA; RELBER AGUIAR GONÇALES; LEONARDO MARTINS-SANTANA; BEATRIZ HENRIQUES FERREIRA; FERNANDO RODRIGUES; RAFAEL SILVA-ROCHA. Synthetic and minimalist vectors for Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of fungi. GENETICS AND MOLECULAR BIOLOGY, v. 42, n. 2, p. 395-398, 2019-06-13. (16/03763-3, 16/01946-3, 14/22561-7, 12/22921-8)