Construção de promotores sintéticos para expressão de celulases usando novos elementos cis-regulatórios em Trichoderma reesei

• Processo: 17/17924-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Vigência (Início): 01 de dezembro de 2017
• Vigência (Término): 30 de abril de 2021
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Rafael Silva Rocha
• Beneficiário: Leonardo Martins Santana
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 12/22921-8 - Abordagens de biologia sintética para decifrar os mecanismos de integração de sinais em promotores bacterianos complexos, AP.JP
• Assunto(s): Biologia sintética Celulase Regulação da expressão gênica Degradação de biomassa Trichoderma reesei
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia Sintetica | Promotores sintéticos | Regulação gênica | Biologia Sintética

Resumo

O estudo de microrganismos produtores de enzimas lignocelulolíticas para degradação da biomassa vegetal possuem um alto interesse biotecnológico para a geração de produtos industriais de alto valor agregado. Nesse sentido, o fungo Trichoderma reesei se destaca como grande produtor de celulases e hemicelulases e é objeto de estudos para a criação de ferramentas de Engenharia Genética que propiciem seu melhoramento para novos processos. Nesse organismo, a ação de fatores de transcrição que controlam a expressão de genes de celulases e hemicelulases vem sendo amplamente estudada. Esta regulação está ligada à interação dos fatores de transcrição com regiões específicas dos promotores destes genes, os chamados elementos cis-regulatórios. O presente plano de trabalho visa a construção de promotores sintéticos através da identificação computacional e caracterização funcional de elementos cis-regulatórios relacionados à regulação da expressão de genes envolvidos na degradação da biomassa vegetal. Para tal, ensaios de validação serão realizados mediante a análise das cinéticas de expressão de promotores de celulases fusionados à GFP via integração cromossômica em T. reesei. Do mesmo modo, promotores sintéticos serão construídos utilizando-se novos elementos cis-regulatórios identificados e seus comportamentos caracterizados. Os objetivos propostos deverão contribuir para um aumento nos conhecimentos acerca dos mecanismos moleculares de regulação transcricional em T. reesei. Além disso, espera-se o desenvolvimento de novas ferramentas de manipulação genética de T. reesei para aplicações biotecnológicas. (AU)

Publicações científicas

(4)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

NORA, LUISA CZAMANSKI; WESTMANN, CAUA ANTUNES; MARTINS-SANTANA, LEONARDO; ALVES, LUANA DE FATIMA; OLIVEIRA MONTEIRO, LUMMY MARIA; GUAZZARONI, MARIA-EUGENIA; SILVA-ROCHA, RAFAEL. The art of vector engineering: towards the construction of next-generation genetic tools. MICROBIAL BIOTECHNOLOGY, v. 12, n. 1, p. 125-147, JAN 2019. (16/19179-9, 17/17924-1, 16/06323-4, 16/05472-6, 16/03763-3, 15/04309-1, 12/22921-8)

MARTINS-SANTANA, LEONARDO; NORA, LUISA C.; SANCHES-MEDEIROS, ANANDA; LOVATE, GABRIEL L.; CASSIANO, MURILO H. A.; SILVA-ROCHA, RAFAEL. Systems and Synthetic Biology Approaches to Engineer Fungi for Fine Chemical Production. FRONTIERS IN BIOENGINEERING AND BIOTECHNOLOGY, v. 6, OCT 3 2018. (15/22386-3, 17/17924-1, 16/11093-8, 17/04217-5, 16/03763-3, 12/22921-8)

LEONARDO MARTINS-SANTANA; RENATO GRACIANO DE PAULA; ADRIANO GOMES SILVA; DOUGLAS CHRISTIAN BORGES LOPES; ROBERTO DO NASCIMENTO SILVA; RAFAEL SILVA-ROCHA. CRZ1 regulator and calcium cooperatively modulate holocellulases gene expression in Trichoderma reesei QM6a. GENETICS AND MOLECULAR BIOLOGY, v. 43, n. 2, 2020-05-08. (17/17924-1, 12/22921-8)

OLIVEIRA MONTEIRO, LUMMY MARIA; ARRUDA, LETICIA MAGALHAES; SANCHES-MEDEIROS, ANANDA; MARTINS-SANTANA, LEONARDO; DE FATIMA ALVES, LUANA; DEFELIPE, LUCAS; GUSTAVO TURJANSKI, ADRIAN; GUAZZARONI, MARIA-EUGENIA; DE LORENZO, VICTOR; SILVA-ROCHA, RAFAEL. Reverse Engineering of an Aspirin-Responsive Transcriptional Regulator in Escherichia coli. ACS SYNTHETIC BIOLOGY, v. 8, n. 8, p. 1890-1900, AUG 2019. (16/19179-9, 17/17924-1, 16/06323-4, 18/04810-0, 15/04309-1, 12/22921-8)