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Construção de promotores sintéticos para expressão de celulases usando novos elementos cis-regulatórios em Trichoderma reesei

Processo: 17/17924-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Vigência (Início): 01 de dezembro de 2017
Vigência (Término): 30 de abril de 2020
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
Pesquisador responsável:Rafael Silva Rocha
Beneficiário:Leonardo Martins Santana
Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:12/22921-8 - Abordagens de biologia sintética para decifrar os mecanismos de integração de sinais em promotores bacterianos complexos, AP.JP
Assunto(s):Biologia sintética   Celulase   Regulação da expressão gênica   Degradação de biomassa   Trichoderma reesei

Resumo

O estudo de microrganismos produtores de enzimas lignocelulolíticas para degradação da biomassa vegetal possuem um alto interesse biotecnológico para a geração de produtos industriais de alto valor agregado. Nesse sentido, o fungo Trichoderma reesei se destaca como grande produtor de celulases e hemicelulases e é objeto de estudos para a criação de ferramentas de Engenharia Genética que propiciem seu melhoramento para novos processos. Nesse organismo, a ação de fatores de transcrição que controlam a expressão de genes de celulases e hemicelulases vem sendo amplamente estudada. Esta regulação está ligada à interação dos fatores de transcrição com regiões específicas dos promotores destes genes, os chamados elementos cis-regulatórios. O presente plano de trabalho visa a construção de promotores sintéticos através da identificação computacional e caracterização funcional de elementos cis-regulatórios relacionados à regulação da expressão de genes envolvidos na degradação da biomassa vegetal. Para tal, ensaios de validação serão realizados mediante a análise das cinéticas de expressão de promotores de celulases fusionados à GFP via integração cromossômica em T. reesei. Do mesmo modo, promotores sintéticos serão construídos utilizando-se novos elementos cis-regulatórios identificados e seus comportamentos caracterizados. Os objetivos propostos deverão contribuir para um aumento nos conhecimentos acerca dos mecanismos moleculares de regulação transcricional em T. reesei. Além disso, espera-se o desenvolvimento de novas ferramentas de manipulação genética de T. reesei para aplicações biotecnológicas. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
OLIVEIRA MONTEIRO, LUMMY MARIA; ARRUDA, LETICIA MAGALHAES; SANCHES-MEDEIROS, ANANDA; MARTINS-SANTANA, LEONARDO; DE FATIMA ALVES, LUANA; DEFELIPE, LUCAS; GUSTAVO TURJANSKI, ADRIAN; GUAZZARONI, MARIA-EUGENIA; DE LORENZO, VICTOR; SILVA-ROCHA, RAFAEL. Reverse Engineering of an Aspirin-Responsive Transcriptional Regulator in Escherichia coli. ACS SYNTHETIC BIOLOGY, v. 8, n. 8, p. 1890-1900, AUG 2019. Citações Web of Science: 1.
NORA, LUISA CZAMANSKI; WESTMANN, CAUA ANTUNES; MARTINS-SANTANA, LEONARDO; ALVES, LUANA DE FATIMA; OLIVEIRA MONTEIRO, LUMMY MARIA; GUAZZARONI, MARIA-EUGENIA; SILVA-ROCHA, RAFAEL. The art of vector engineering: towards the construction of next-generation genetic tools. MICROBIAL BIOTECHNOLOGY, v. 12, n. 1, p. 125-147, JAN 2019. Citações Web of Science: 4.
MARTINS-SANTANA, LEONARDO; NORA, LUISA C.; SANCHES-MEDEIROS, ANANDA; LOVATE, GABRIEL L.; CASSIANO, MURILO H. A.; SILVA-ROCHA, RAFAEL. Systems and Synthetic Biology Approaches to Engineer Fungi for Fine Chemical Production. FRONTIERS IN BIOENGINEERING AND BIOTECHNOLOGY, v. 6, OCT 3 2018. Citações Web of Science: 5.

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