O papel das proteínas DLC2 e miosina Va na sinalização de Hedgehog dependente do cílio primário

• Processo: 16/05956-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Enilza Maria Espreafico
• Beneficiário: Talita Perez Sanches
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Oncologia Proteínas Hedgehog Organelas celulares Expressão gênica Homeostase Cílios Miosinas Reação em cadeia por polimerase (PCR) Microscopia de fluorescência
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cadeia Leve de Dineina 2 | câncer | Cilio Primario | miosina Va | Via Hedgehog | Oncologia

Resumo

Os cílios primários são estruturas encontradas em quase todos os tipos de células nos vertebrados. Defeitos nessa estrutura ou na função da via de sinalização de Hedgehog (Hh), dependente do cílio primário, podem ocasionar algumas doenças e síndromes, nomeadas por ciliopatias. Sabe-se que diversas proteínas têm localização em regiões específicas do cílio primário e podem modular a ciliogênese, afetando sua dinâmica e função. Uma das vias envolvidas nesse processo é a via de Hh, importante no desenvolvimento embrionário, modulando diferentes tecidos. A manutenção do cílio primário é dependente do transporte de diferentes proteínas para esta estrutura,o qual por sua vez é dependente da maquinaria intraflagelar (IFT) e envolve uma variedade de complexos proteicos que incluem muitos motores moleculares, como cinesinas, dineínas e miosinas, além de adaptadores de cargo. A DLC2 está envolvida no transporte de organelas citoplasmáticas, mitose e migração nuclear e também nas funções dependentes de motores moleculares. O projeto tem como objetivo avaliar a importância de miosina Va e DLC2 sobre a via Hh, além da investigação da função e localização destas proteínas na estrutura do cílio primário. No estudo serão utilizadas abordagens de expressão gênica por PCR em tempo real e técnicas de microscopia de fluorescência para analisar a localização e estrutura do cílio em cultura de células tumorais modificadas geneticamente para os genes em estudo. Sabendo que diversas proteínas se localizam em regiões específicas no cílio primário e podem modular a ciliogênese, alterando conseqüentemente sua dinâmica e função, elucidar a localização e função de novos candidatos que regulam a homeostase ciliar pode nos trazer uma nova abordagem de intervenção em processos dependentes desta organela.