O papel de três fatores de transcrição ApiAP2 no controle na transcrição no ciclo intraeritrocítico e sexual de Plasmodium falciparum

• Processo: 16/12659-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2017
• Data de Término da vigência: 25 de novembro de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Gerhard Wunderlich
• Beneficiário: Eliana Fernanda Galindo Cubillos
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 19/16129-9 - Estudo da função de fatores de transcrição ApiAP2 durante o ciclo sexual de Plasmodium falciparum, BE.EP.DR
• Assunto(s): Plasmodium falciparum Transcrição genética
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: apiap2 | Plasmodium falciparum | transcricao | biologia molecular de Plasmodium falciparum

Resumo

O protozoário Plasmodium falciparum é responsável pelas formas mais grave da malária humana, sendo as pessoas mais vulneráveis crianças menores de 5 anos de idade e mulheres grávidas. Para escapar da resposta imune do hospedeiro, formas assexuadas do parasita usam variação antigênica de genes associados à virulência e diferenciação sexual como estratégia para sobreviver e garantir a sua transmissão para o mosquito, onde ocorre a reprodução sexual. A base molecular por trás deste processo é ainda pouco conhecida. Até agora um número de enzimas modificadoras de cromatina foram associadas tanto no processo de variação antigênica quanto na formação de gametócitos. No entanto, não se sabe como o parasita controla estes fenômenos, nem os mecanismos que desencadeiam estes processos e os possíveis fatores de transcrição que podem estar envolvidos. Neste projeto, propõe-se abordar a participação de três fatores de transcrição da família ApiAP2, PF3D7_1143100, PF3D7_1466400 e PF3D7_1007700, no controle da transcrição de genes na fase intraeritrocítica e sexual de P. falciparum. Investigaremos o efeito da perda da função destas proteínas no desenvolvimento intra eritrocítico e no mosquito. Serão comparadas duas condições, "ON" e "OFF" para a expressão de cada proteína alvo. Para isso utilizaremos linhagens de parasitas geneticamente modificados que i) têm a região C-terminal das proteínas ApiAP2 marcadas com um domínio de desestabilização que, pode ser estabilizado através da incubação dos parasitas com uma molécula chamada Shield-1 ou ii) tem a sequencia da ribozima glmS localizada na região 3 UTR dos transcritos alvos, que induz a autoclivagem na presença de Glucosamina. Esses dois mecanismos de silenciamento gênico transformam tanto o transcrito quanto a proteína reguláveis. Uma vez que as proteínas de interesse também terão um marcador HA identificaremos por Chip-Seq as sequencias específicas onde estes fatores de transcrição se ligam. Este estudo irá contribuir com novas informações sobre o controle de transcrição em P. falciparum, e provavelmente irá apontar para novos alvos de drogas já que i)a interferência de um possível processo chave para a sobrevivência do parasita o torna mai vulnerável, e ii) os fatores de transcrição ApiAP2 estão ausentes no hospedeiro humano. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

PRATA, ISADORA OLIVEIRA; GALINDO CUBILLOS, ELIANA FERNANDA; KRUGER, ARNE; BARBOSA, DEIBS; MARTINS, JOAQUIM; SETUBAL, JOAO CARLOS; WUNDERLICH, GERHARD. Plasmodium falciparum Acetyl-CoA Synthetase Is Essential for Parasite Intraerythrocytic Development and Chromatin Modification. ACS INFECTIOUS DISEASES, v. 7, n. 12, p. 3224-3240, DEC 10 2021. (17/24267-7, 16/12659-5, 18/08820-0, 15/26722-8)

CUBILLOS, ELIANA F. G.; PRATA, ISADORA OLIVEIRA; FOTORAN, WESLEY LUZETTI; RANFORD-CARTWRIGHT, LISA; WUNDERLICH, GERHARD. The Transcription Factor PfAP2-O Influences Virulence Gene Transcription and Sexual Development in Plasmodium falciparum. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 11, JUN 28 2021. (16/12659-5, 17/24267-7, 15/17174-7, 16/19145-7)