Avaliação da ação protetora de vacinas experimentais de segunda geração visando à prevenção e o controle da papilomatose bovina.

• Processo: 17/00469-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2017
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2018
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária
• Pesquisador responsável: Rita de Cassia Stocco
• Beneficiário: Thaylene Alexandra Nascimento Lima
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 16/09450-7 - Avaliação da ação protetora de vacinas experimentais de segunda geração visando a prevenção e controle da papilomatose bovina, AP.R
• Assunto(s): Carga viral Biologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Carga Viral | Identificação viral | papilomavírus bovino | PCR Real-Time | Biologia molecular

Resumo

Considerando que a vacinação tem por objetivo reduzir ou erradicar um determinado patógeno, é de fundamental importância monitorar os níveis de expressão das proteínas virais como indicativo de uma possível redução da carga viral. Embora o emprego da PCR Real-time para avaliação de expressão gênica seja amplamente difundido, o uso deste método para o diagnóstico e determinação da carga viral do papilomavírus bovino (BPV) permanece pouco explorado. Neste sentido, a bolsista será responsável pela padronização da PCR Real-time para fins diagnósticos, buscando avaliar a carga viral durante o processo de vacinação experimental previsto na segunda fase do projeto regular apresentado a FAPESP. Tendo em vista que tal padronização é um processo laborioso, solicito a outorga da bolsa técnica de nível III para darmos início ao processo de padronização da técnica afim de garantir o cumprimento do cronograma apresentado. Neste sentido, as atividades da bolsista consistirão em: isolar os linfócitos após coleta de sangue periférico, extrair o RNA mensageiro (mRNA), construir o DNA complementar (cDNA) usando kits comerciais baseados em primersrandômicos, estabelecer o protocolo de PCR em tempo real usando primersespecíficos para BPV-1, 2 e 4 (já desenhados) e correlacionar os níveis de expressão de proteínas late (L) e early(E) do vírus com a carga viral.