O déficit respiratório em um modelo experimental da Doença de Parkinson pode estar associado a alterações no gene Phox2b ao nível da medula ventrolateral

• Processo: 17/11165-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 31 de julho de 2017
• Data de Término da vigência: 14 de junho de 2018
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Geral
• Pesquisador responsável: Ana Carolina Takakura Moreira
• Beneficiário: Silvio de Araujo Fernandes Junior
• Supervisor: José Javier Otero
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Ohio State University, Columbus, Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 14/20695-6 - Análise da ativação seletiva de neurônios bulbares em modelo experimental da Doença de Parkinson: um estudo temporal dos possíveis mecanismos para restauração da função respiratória, BP.DR
• Assunto(s): Doença de Parkinson Controle biológico Respiração (fisiologia) Habilidades motoras Neuroanatomia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Parkinson's disease | Phox2b | respiratory control | retrotrapezoid nucleus | Controle neural cardiorespiratório

Resumo

A doença de Parkinson (DP) é uma doença caracterizada por sintomas motores e não motores, como déficits respiratórios, associada à perda de neurônios dopaminérgicos na parte compacta da substância negra (SNc). No entanto, outros neurônios do tronco cerebral podem também ser degenerados, contribuindo para o aparecimento de anomalias não motoras. Estudo prévio mostrou uma diminuição no número de neurônios que expressam phox2b do núcleo retrotrapezoidal (RTN) e uma redução na frequência respiratória induzida por repouso e hipercapnia. Objetivo: comparar as alterações neuroanatômicas e biomoleculares no RTN e investigar se o déficit funcional respiratório após a indução de um modelo de DP pode ocorrer por alterações biomoleculares ou morte neuronal em células que expressam o fator de transcrição nuclear phox2b dentro do RTN. Métodos: Serão utilizados ratos machos adultos com injeções bilaterais de 6-hidroxi-dopamina (6-OHDA, 24 ¼g / ¼l) ou veículo no corpo estriado. O tronco encefálico será cortado em secções de 8 ¼m e mantido a -80 ° C até à sua utilização. A captura de laser e a catapulta de pressão (LMPC) serão realizadas utilizando o sistema de microdissecção a laser da PALM Technologies (Carl Zeiss MicroImaging GmbH, München, Alemanha). O número total de células capturadas será determinado usando o fator de conversão de 50.000 ¼m2. Após a conclusão da microdissecção, o material capturado será centrifugado num tubo de PCR de 0,2 mL e mantido a -80 ° C até a recuperação da proteína. Para a espectrometria de massa, os peptídeos serão separados por HPLC de fase reversa (sistema HPLC Dionex Ultimate 3000 capilares/nano, Dionex, Sunnyvale, CA) e massa analisada com um Thermo Fisher LTQ Orbitrap XL, equipado com fontes de ionização micro/nanospray (Michrom Bioresources Inc., Auburn, CA). A imuno-histoquímica será realizada para a detecção da tirosina-hidroxilase e avaliar a extensão e seletividade da lesão 6-OHDA. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

OLIVEIRA, LUIZ M.; FERNANDES-JUNIOR, SILVIO A.; CABRAL, LAIS M. C.; MIRANDA, NICOLE C. S.; CZEISLER, CATHERINE M.; OTERO, JOSE J.; MOREIRA, THIAGO S.; TAKAKURA, ANA C.. Regulation of blood vessels by ATP in the ventral medullary surface in a rat model of Parkinson's disease. Brain Research Bulletin, v. 187, p. 17-pg., 2022-07-12. (15/23376-1, 17/11165-1, 19/09323-3, 14/20695-6, 19/01236-4)

FERNANDES-JUNIOR, SILVIO A.; OLIVEIRA, LUIZ M.; CZEISLER, CATHERINE M.; MO, XIAOKUI; ROY, SASHWATI; SOMOGYI, ARPAD; ZHANG, LIEWN; MOREIRA, THIAGO S.; OTERO, JOSE J.; TAKAKURA, ANA C.. Stimulation of retrotrapezoid nucleus Phox2b-expressing neurons rescues breathing dysfunction in an experimental Parkinson's disease rat model. Brain Pathology, v. 30, n. 5, JUL 2020. (16/23281-3, 14/20695-6, 15/23376-1, 17/11165-1)