Efeito da inibição dos receptores de fator de crescimento fibroblástico na diferenciação do endoderma primitivo em embriões bovinos produzidos in vitro

• Processo: 19/21303-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2019
• Data de Término da vigência: 13 de julho de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Marcelo Demarchi Goissis
• Beneficiário: Gabriel Siqueira dos Santos
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/09576-3 - Estudos sobre mecanismos de diferenciação celular durante o desenvolvimento embrionário inicial em bovinos, AP.JP
• Assunto(s): Biotecnologia da reprodução Endoderma Embrião de animal Fertilização in vitro Técnicas in vitro Microscopia confocal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Epiblasto | Gata6 | massa interna celular | Nanog | Sox17 | Biotecnologia da Reprodução

Resumo

A segregação das linhagens celulares e a implantação do embrião são eventos definitivos para o sucesso da gestação. As primeiras divisões celulares resultam na divisão entre trofectoderma (TE) e massa interna celular (MCI). Na sequência, a MCI é diferenciada em epiblasto (EPI) e endoderma primitivo (PE). Sabe-se que, em embriões murinos, o fator de transcrição NANOG promove a secreção de fator de crescimento fibroblástico (FGF) o qual ativa receptores de FGF (FGFR) e subsequentemente a via MEK/ERK. Este mecanismo leva à diferenciação de células de MCI em células de PE. Estudos recentes sugerem que a inibição da via MEK/ERK reduz número de células do PE em embriões bovinos. A hipótese deste projeto é que a sinalização por receptores de FGF não interfere na especificação do PE em embriões bovinos. O objetivo do estudo é avaliar o papel da sinalização por FGF na especificação do EPI e do PE em embriões bovinos por meio da inibição farmacológica do FGFR. Embriões bovinos produzidos in vitro serão tratados com inibidor de FGFR AZD4547 em diferentes momentos do desenvolvimento: dia 5 ao dia 7 após a fertilização in vitro, dia 7 ao dia 9, o terceiro do dia 5 ao dia 9. Também haverá um grupo controle não-tratado, e outro tratado com DMSO. Os blastocistos serão fixados em paraformaldeído para realização de imunofluorescência, visando verificar as células que expressam GATA6, NANOG e SOX17 em microscopia confocal. Espera-se com este trabalho compreender melhor o papel da via de sinalização do FGF na segregação de EPI e PE.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SANTOS, GABRIEL S.; MARTINS, MATHEUS P.; LUEDKE, FELIPE E.; TANAKA, YUKI; CARREIRO, LETICIA E.; MENDES, CAMILLA MOTA; GOISSIS, MARCELO DEMARCHI. Inhibition of FGF receptor impairs primitive endoderm differentiation in bovine embryos. REPRODUCTION IN DOMESTIC ANIMALS, v. 58, n. 2, p. 9-pg., 2022-11-14. (19/21303-8, 19/22798-0, 17/09576-3)

CARREIRO, LETICIA ESCOBAR; DOS SANTOS, GABRIEL SIQUEIRA; LUEDKE, FELIPE EDUARDO; GOISSIS, MARCELO DEMARCHI. ell differentiation events in pre-implantation mouse and bovine embryo. ANIMAL REPRODUCTION, v. 18, n. 4, 2021. (19/22649-5, 19/21303-8, 19/03014-9, 17/09576-3)

LETÍCIA ESCOBAR CARREIRO; GABRIEL SIQUEIRA DOS SANTOS; FELIPE EDUARDO LUEDKE; MARCELO DEMARCHI GOISSIS. Cell differentiation events in pre-implantation mouse and bovine embryos. Animal Reproduction, v. 18, n. 4, 2022-01-07. (19/21303-8, 19/03014-9, 19/22649-5, 17/09576-3)