Avaliação da participação das quinases humanas NEK4 e Nek5 na via intrínseca da apoptose após dano de DNA

• Processo: 19/25188-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2020
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2021
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Jörg Kobarg
• Beneficiário: Ana Luisa Rodrigues de Oliveira
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/03489-1 - De estudos funcionais à busca de novos inibidores anticâncer: explorando cinases reguladores do ciclo celular da família de NEK humana, AP.TEM
• Assunto(s): Biologia computacional Dano ao DNA Transdução de sinais Etoposídeo Autofagia Linhagem celular Processos biológicos Espectrometria de massas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: apoptosis | DNA damage | kinase signaling | protein phosphorylation | Sinalização celular

Resumo

As Neks (Nima-Related Kinases) constituem uma família de quinases com importantes funções na regulação do ciclo celular, resposta a danos de DNA e manutenção dos cílios primários. A Nek4 já foi relacionada a estas três funções, mas seu exato papel nestes processos biológicos ainda não é claro. Dados da literatura demonstraram que Nek4 interage com proteínas envolvidas na via de reparação não homóloga (NHEJ) e que na ausência de Nek4 as células sãomais resistentes a agentes como etoposídeo. Ainda, já foi demonstrado que a expressão de Nek4 é alterada em câncer de cólon e células de câncer de pulmão depletadas de Nek4 respondem diferentemente a quimioterápicos, sendo mais resistentes a uns e mais sensíveis a outros. Estudos demonstrando a participação da Nek4 na regulação da função mitocondrial estão em desenvolvimento no nosso grupo e já apontam para uma função importante na dinâmicamitocondrial e processo de autofagia. Sobre a Nek5, dados da literatura indicam que ela estáenvolvida na diferenciação miogênica, através da regulação da atividade da caspase-3. Nosso grupo demonstrou que ela está envolvida no processo de morte celular através de defeitos na cadeia respiratória mitocondrial e formação de espécies reativas de oxigênio. Além disso, dados bioinformáticos reforçam a teoria sobre o envolvimento da proteína quinase Nek5 com asdesregulações celulares que ocorrem no câncer, já que essa encontra-se mutada em diversos tipos de cânceres. Ensaios de duplo híbrido em levedura e espectrometria de massas revelaram ainteração de Nek4 e Nek5 com BCLAF1, um repressor transcricional que interage com vários membros da família de proteínas Bcl-2, proteínas importantes na regulação da via de apoptose intrínseca. Diante desses dados, o intuito do presente é investigar alterações na via de apoptose em linhagens celulares com alterações na expressão de Nek4 e Nek5. Ainda, pretendemos esclarecer se as Neks 4 e 5 desempenham algum papel na sinalização mitocôndria-núcleo em resposta a estímulos estressores através da sua interação com BCLAF1.