Nanopartículas formadas por proteínas recombinantes modulares: novas plataformas de combate às células tumorais

• Processo: 20/00616-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2020
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Adriano Rodrigues Azzoni
• Beneficiário: Fernanda Santos de Oliveira
• Instituição Sede: Escola Politécnica (EP). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Terapia genética Células tumorais Ácidos nucleicos Nanopartículas Proteínas recombinantes Interferência de RNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Nanopartículas | Proteinas recombinantes | RNA de interferência | terapia genética | Entrega de Drogas

Resumo

A baixa eficiência de transferência de ácidos nucléicos para células tumorais é um problema recorrente em estudos de terapia gênica para o tratamento do câncer. Isso surge, principalmente, pela dificuldade de direcionamento e transporte das moléculas terapêuticas do exterior para o interior das células alvo, devido à presença de inúmeras barreiras físicas, enzimáticas e difusionais. Nosso grupo de pesquisa tem, ao longo dos últimos anos, desenvolvido proteínas recombinantes multifuncionais especialmente desenhadas para entrega gênica, buscando mimetizar a habilidade dos vírus de explorar as sinalizações e respostas extra- e intra-celulares para infectar as células. O principal objetivo deste projeto é o desenvolvimento e caracterização de novas proteínas recombinantes multifuncionais, capazes de se auto-organizarem em nanopartículas e realizar eficientemente o transporte de material genético (RNA de interferência) para o interior de células tumorais. Para esse fim, a proteína repórter GFP será fusionada a uma Desintegrina (Echistatina) que servirá como domínio de direcionamento. A proteína modular também contará com um domínio de interação com ácidos nucléicos baseado em argininas. Espera-se, dessa forma, a obtenção de nanopartículas siRNA-Proteína capazes de eficientemente proteger, direcionar, facilitar a entrada na célula e o tráfego intracelular de transgenes. A cinética de formação das nanopartículas, estabilidade e parâmetros físico-químicos como diâmetro hidrodinâmico e potencial zeta serão então avaliados e correlacionados com a eficiência de entrega do RNA para células tumorais. Para isso, moléculas de siRNA modelo capazes de silenciar o gene repórter Luciferase serão utilizadas nos estudos de formação das nanopartículas e de transfecção. Espera-se, dessa forma, o desenvolvimento de novos vetores protéicos capazes de eficientemente transportar e direcionar transgenes para células tumorais, além de levantar informações importantes sobre os mecanismos envolvidos nos processos de complexação, direcionamento, internalização e tráfego intracelular. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

OLIVEIRA, Fernanda Santos de. Nanopartículas formadas por proteínas recombinantes modulares como plataformas de gene delivery e combate às células tumorais. 2023. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Escola Politécnica (EP/BC) São Paulo.