Estímulo do embrião bovino na expressão de novos marcadores da gestação em células imunes no início do diestro

• Processo: 20/11348-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2020
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2021
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Guilherme Pugliesi
• Beneficiário: Pedro Pisani de Freitas
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 15/10606-9 - Inovações no diagnóstico precoce da gestação em bovinos, AP.JP
• Assunto(s): Biotecnologia da reprodução Embrião de animal Interferon tau Prenhez Transcriptômica Análise de sequência de RNA Diestro Bovinos de corte
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Gado De Corte | Interferon-tau | Prenhez | Fisiologia e Biotecnologia da Reprodução

Resumo

Na presente proposta, se objetiva determinar quais genes identificados por análise transcriptomica por meio de RNASeq (Rocha et al., 2020) já são estimulados pelo concepto bovino no início do diestro em dois grupos de células imunes da circulação periférica, as PMNs (neutrófilos, basófilos e eosinófilos) e as PBMCs (monócitos e linfócitos). Estes transcritos podem apresentar uma resposta mais precoce e mais acentuada ao estímulo do interferon-tau para servir como base na identificação de um marcador do estado gestacional com melhor acurácia em relação aos genes estimulados por interferon (ISG) clássicos. Para isso, fêmeas de corte serão submetidas a superovulação, inseminação artificial e colheita de embriões no Dia 7 (Dia 0 = dia do estro). No momento da colheita dos embriões uma amostra de sangue (40mL) será colhida para isolamento das PMNs e PBMCs. Os embriões colhidos serão avaliados e aqueles classificados com ótima qualidade morfológica serão cultivados por 12 hs e o meio de cultivo será adicionado em cultivo de PMNs e PBMCs colhidas de vacas não-gestantes. A expressão dos novos transcritos identificados no Experimento 1 do projeto de Jovem pesquisador será avaliada nas células imunes cultivadas e nas células isoladas no momento da colheita dos embriões em comparação a PMNs e PBMCs cultivadas sem meio de cultivo dos embriões e isoladas de fêmeas não-inseminadas (grupo controle). (AU)