Desenvolvimento e validação de células T-CAR anti-BCMA com perfil de diferenciação de memória para tratamento de Mieloma Múltiplo

• Processo: 20/10804-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2020
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia
• Pesquisador responsável: Dimas Tadeu Covas
• Beneficiário: Caio Raony Farina Silveira
• Instituição Sede: Hemocentro de Ribeirão Preto. Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da USP (HCMRP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/08135-2 - CTC - Centro de Terapia Celular, AP.CEPID
• Assunto(s): Terapia baseada em transplante de células e tecidos Linfócitos T Plasmócitos Mieloma múltiplo Imunoterapia adotiva Citotoxicidade Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bcma | células CAR-T | mieloma múltiplo | Terapia Celular com células T

Resumo

O Mieloma Múltiplo é uma neoplasia hematológica comum, relacionada à alta morbimortalidade. A despeito dos progressos relacionados à melhor compreensão da doença e sua fisiopatologia, a doença ainda permanece considerada praticamente incurável, se comportando com períodos de remissão e recidiva, sendo que ao longo do tempo, os períodos de remissão tendem a ficar cada vez mais curtos, e as recidivas mais frequentes e agressivas. A terapia celular anti-CD19 vem se mostrado bastante eficaz no tratamento de linfomas e leucemias B, refratários ou recidivados após o tratamento habitual. Recentemente, um possível alvo para terapia com células T-CAR chamado BCMA foi identificado em plasmócitos neoplásicos de Mieloma Múltiplo. O presente projeto tem como objetivo principal desenvolver e avaliar a capacidade de linfócitos T geneticamente modificados que expressam o CAR anti-BCMA em erradicar plasmócitos neoplásicos de Mieloma Múltiplo. Para tal objetivo, será utilizado um vetor lentiviral de segunda geração contendo o clone anti-BCMA. Três novos clones de BCMA, selecionados através de biopainel, serão utilizados. O processo de seleção do novos clones e desenho dos vetores foram terceirizados para a empresa líder do mercado mundial e de reconhecida reputação Creative Biolabs (EUA). Anticorpos selecionados de alta especificidade contra o BCMA darão origem ao fragmento scFv que será incorporado ao vetor lentiviral com molécula coestimulatória (41BB) e um gene de segurança e marcação (EGFR), para posterior expressão nos linfócitos T. Em seguida, as etapas citadas serão realizadas: 1) produção das partículas lentivirais e transdução de linhagem celular Jukart; 2) coleta de células mononucleares do sangue periférico; 3) transdução lentiviral dos linfócitos T; 4) controle de qualidade da geração das células T-CAR; 5) caracterização imunofenotípica; 6) ensaio de citotoxicidade in vitro e 7) ensaio com modelo in vivo de camundongos xenotransplantados. Células T de memória (memória central ou tronco de memória central) serão selecionadas para modificação genética e avaliação do perfil de citotoxicidade e persistência in vivo. Ao final do presente projeto, esperamos caracterizar e validar novos vetores lentivirais para a modificação genética de células T que poderão expressar o anti-BCMA e, por conseguinte, erradicar plasmócitos do Mieloma Múltiplo. Em seguida, espera-se que tal projeto sedimente o caminho para a utilização dos novos vetores na manufatura de células CAR T anti-BCMA em padrão de Boas Práticas de Fabricação (BPF) e compatíveis para uso em ensaio clínico de fase I em humanos. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

FARINA SILVEIRA, CAIO RAONY; CORVELONI, AMANDA CRISTINA; CARUSO, SAMIA RIGOTTO; MACEDO, NATHALIA ARAUJO; BRUSSOLO, NATALIA MOSCHETA; HADDAD, FELIPE; FERNANDES, TAISA RISQUE; DE ANDRADE, PAMELA VIANI; ORELLANA, MARISTELA DELGADO; GUERINO-CUNHA, RENATO LUIZ. Cytokines as an important player in the context of CAR-T cell therapy for cancer: Their role in tumor immunomodulation, manufacture, and clinical implications. FRONTIERS IN IMMUNOLOGY, v. 13, p. 13-pg., 2022-09-12. (20/10804-3)