Análise da função de RASSF9 em melanoma em modelos 2D e 3D.

• Processo: 20/03304-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2021
• Data de Término da vigência: 12 de setembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: João Gustavo Pessini Amarante Mendes
• Beneficiário: Ronaldo Rodrigues Ribeiro
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 22/08915-7 - Dissecando Ras ativando a produção de citocinas dependente de NF-kB, BE.EP.MS
• Assunto(s): Biologia tumoral Melanoma Neoplasias cutâneas Proteínas proto-oncogênicas CRISPR-Cas9 Linhagem celular tumoral
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: melanoma | proteína Ras | Ras association domain family member 9 | Rassf9 | Biologia de tumor

Resumo

O melanoma é o tipo mais letal de câncer de pele, originado pela transformação de melanócitos, células que promovem a pigmentação da pele. De acordo com as modificações genéticas, podemos dividir o melanoma em quatro grupos distintos, sendo que os dois mais incidentes apresentam sequências modificadas das proteínas B-Raf e Ras. Ras é uma das proteínas mais importantes em tumores sólidos e seus efetores podem ser bons alvos terapêuticos. Membros da família RASSF (Ras-association Family) foram caracterizados por sua participação na indução de apoptose mediada pela ativação de Ras. Essa família gênica é subdividida em dois sub-grupos, o primeiro composto pelo membros RASSF1-6 apresentam o motivo de interação à Ras na porção C-terminal e são os membros mais estudados, enquanto os membros RASSF7-10 apresentam o domínio RalGDS/AF6 na porção N-terminal e há poucas informações sobre suas funções. RASSF9 foi primeiramente descrito como P-CIP1, uma proteína relacionada ao transporte de vesículas. Ela interage com Ras e com ASPP1/2 durante a segregação cromossomal. Além disso, RASSF9 é crucial para a divisão assimétrica que induz a diferenciação dos queratinócitos e a homeostase dermal, curiosamente sua expressão pode ser induzida por exposição solar. Através do sistema CRISPR/Cas9, nós desenvolvemos uma linhagem de melanoma murino não metastática, Tm1.Luc, deficiente para RASSF9. Observamos uma redução na capacidade proliferativa in vitro e in vivo das células deficientes desse gene que pode ser explicada pela supressão da via Ras/Raf/MERK/ERK. Nesta proposta, pretendemos ampliar os estudos em cultura 2D e avaliar o comportamento da linhagem modificada em modelo de cultura em 3D. Além de compararmos o crescimento entre as linhagens deficientes e suficientes, iremos avaliar o status da via Ras/Raf/MERK/ERK, a resposta a quimioterápicos utilizados na clínica médica, e as citocinas liberadas pelos tumores gerados pelas duas linhagens antes e após o tratamento com quimioterápicos.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

RIBEIRO, Ronaldo Rodrigues. Análise da função de RASSF9 em melanoma em modelos 2D e 3D.. 2023. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.