Influência da eferocitose de células de HNSCC no fenótipo de macrófagos

• Processo: 22/01041-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2025
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Carlos Rossa Junior
• Beneficiário: Danilo Paschoal Ferrarezi
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 20/00394-2 - Invasão e metástase de carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço (HNSCC): relevância e interação entre GALR2 e eferocitose no microambiente tumoral e na disseminação hematogênica, AP.TEM
• Assunto(s): Imunologia Eferocitose Macrófagos Carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço Imuno-histoquímica Microambiente tumoral Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço | Eferocitose | Macrófago | Imunologia

Resumo

Apoptose é um evento comum no microambiente do Câncer de Células Escamosas de Cabeça e Pescoço (HNSCC), podendo resultar da hipóxia e escassez de nutrientes em partes da lesão, ou do próprio tratamento citotóxico. Assim, a eferocitose deve ser um processo relevante e muito ativo neste microambiente. A eferocitose é um processo imunologicamente silencioso, que pode ser realizado por diversas células, porém os macrófagos são o protótipo de células fagocíticas. Macrófagos também representam o tipo de célula imune mais prevalente no microambiente de HNSCC. O perfil fenotípico de macrófagos M2/alternativo está associado à maior atividade de eferocitose e também à pior prognóstico de HNSCC. O objetivo desta proposta é investigar, em modelos in vitro (em co-culturas esferóides 3D) e in vivo (modelo de xenoenxerto em camundongos nude) se a inibição da eferocitose reduz a agressividade (invasão, crescimento e disseminação/metástase). O fenótipo dos macrófagos será investigado pela expressão de marcadores M1/M2 (CD80, CD163, CD206) e por análise transcritômica (Nanostring nCounter) e imunohistoquímica (IHC). Apoptose será induzida in vitro por tratamento dos esferóides com doses empiricamente tituladas de 5-fluorouracil capazes de induzir morte de 30-60 das células em 24 h, e in vivo por tratamento dos animais com sub-doses de 5-FU (25 mg/Kg) e cisplatina (2 mg/Kg) administradas intra-peritonialmente (2 x em 7 dias). A eferocitose será inibida in vitro e in vivo pelo bloqueio do reconhecimento da fosfatidilserina exposta ao meio extracelular (Bavituximab, Creative Biolabs) ou por inibidor bioquímico seletivo de RAC1 (Tocris Bioscience). A hipótese central neste projeto é que no microambiente tumoral de HNSCC, a maior atividade de eferocitose favorece a invasão e disseminação tumoral facilitada por macrófagos. (AU)