O fator sigma RpoS em isolados ambientais do gênero Kluyvera

• Processo: 22/02115-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Beny Spira
• Beneficiário: Vinícius Freitas de Oliveira
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Genética molecular Microbiologia RNA polimerases Fator sigma Biofilmes Virulência Kluyvera Variação fenotípica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: fator sigma | Kluyvera | rpoS | Microbiologia

Resumo

O gene rpoS codifica o fator Ãs da RNA polimerase, responsável pela transcrição de genes relacionados a funções adaptativas como a resistência ao estresse global (p. ex., extremos de pH, osmolaridade, desidratação, oxidação), formação de biofilme e virulência, sendo importante para a sobrevivência de bactérias em condições não-ideais de crescimento. Algumas enterobactérias são patógenos oportunistas e sua capacidade destas bactérias em sobreviver em ambientes em constante mudança é essencial para o processo de virulência. Kluyvera é um gênero da família Enterobacteriaceae. Algumas espécies deste gênero podem causar doenças em humanos, mas ainda assim, são pouco estudadas. Neste projeto, isolamos 21 cepas de Kluyvera de um córrego urbano poluído, e caracterizamos estas cepas, preliminarmente, quanto ao nível intrínseco de RpoS em cada uma delas. O presente estudo, tem como objetivo validar os níveis de RpoS das 21 cepas de Kluyvera através de análises fenotípicas dependentes de RpoS. Para isto, isolados com altos níveis desta proteína terão o locus rpoS deletado, ao passo que cepas que apresentam baixos níveis de RpoS serão transformadas com plasmídeos rpoS+ para incrementar a expressão desta proteína. Os isolados naturais, bem como as cepas recombinantes serão então testadas em relação a diversas características como sensibilidade a estresses ambientais e capacidade de crescimento com fontes alternativas de carbono. Outro objetivo será avaliar a sensibilidade dessas bactérias a antibióticos e observar a produção de biofilme. Os dados de sensibilidade a antibióticos e formação de biofilme serão correlacionados com os níveis de RpoS das cepas.(AU)