Estudos funcionais e estruturais da proteína ortóloga a PinX1 e sua influência nos telômeros de Leishmania spp

• Processo: 21/14798-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2022
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Maria Isabel Nogueira Cano
• Beneficiário: Stephany Cacete de Paiva
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 18/04375-2 - Estudos sobre a biogênese e composição do complexo ribonucleoprotéico da telomerase de Leishmania spp. e sua regulação, AP.TEM
• Assunto(s): Telômero Protozoa Leishmania Telomerase Ribonucleoproteínas Complexo de inativação induzido por RNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: complexo ribonucleoproteico da telomerase | Leishmania spp | Pinx1 | telômeros | biologia dos telômeros de protozoários

Resumo

Leishmanioses são um conjunto de doenças que se manifestam de diferentes formas podendo causar a forma tegumentar (cutânea), a mucocutânea e a visceral (calazar). São causadas por protozoários do gênero Leishmania transmitidos pela picada de insetos flebotomíneos. Os tratamentos disponíveis possuem baixa eficácia, alta toxicidade e custo financeiro elevado, podendo levar à resistência dos parasitos, o que justifica a busca por novos medicamentos e alvos terapêuticos. Os telômeros de Leishmania são alvos em potencial para o desenvolvimento de novos fármacos e entender a biologia desta estrutura se faz necessário. Os telômeros são os terminais físicos dos cromossomos lineares e estão diretamente implicados com a manutenção e estabilidade do genoma, pois impedem degradação de fusões terminais que são eventos deletérios a homeostase celular. Os telômeros do parasito e da maioria dos eucariotos, são mantidos por ação da telomerase, cuja atuação também é regulada por proteínas associadas ao complexo e por proteínas teloméricas que tornam a sua atividade mais efetiva e estável. Até o momento, o complexo telomérico de Leishmania amazonensis é o melhor caracterizado dentre os tripanosomatídeos, porém pouco se sabe sobre a biogênese e a composição exata deste complexo. Resultados preliminares do nosso grupo indicam que no genoma de Leishmania spp. existe um ortólogo para uma dessas proteínas regulatórias, a proteína PinX1, considerada uma proteína acessória do complexo ribonucleoproteico da telomerase. Em eucariotos modelo, a PinX1 atua como inibidor natural da atividade enzimática sequestrando o componente TERT do complexo telomerase RNP. A proteína ortóloga a PinX1 em Leishmania apresenta o domínio N-terminal conservado rico em glicinas (G-patch) e um domínio C-terminal de interação com a telomerase (TID, Telomerase Inhibitory Domain) e com a proteína TRF1 de mamíferos, menos conservado. Nosso objetivo é realizar testes biofísicos buscando elucidar a estrutura de PinX1 de Leishmania spp. e como ela interage com os componentes TERT e o TER do complexo telomerase, bem como iniciar estudos funcionais obtendo linhagens superexpressoras e nocaute para PinX1. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ASSIS, LUIZ HENRIQUE DE CASTRO; DE PAIVA, STEPHANY CACETE; CANO, MARIA ISABEL NOGUEIRA. Behind Base J: The Roles of JBP1 and JBP2 on Trypanosomatids. PATHOGENS, v. 12, n. 3, p. 14-pg., 2023-03-01. (21/04253-7, 21/14798-0, 18/04375-2)

DA SILVA, VITOR LUIZ; DE PAIVA, STEPHANY CACETE; DE OLIVEIRA, HAMINE CRISTINA; FERNANDES, CARLOS ALEXANDRE H.; SALVADOR, GUILHERME HENRIQUE MARCHI; FONTES, MARCOS ROBERTO DE M.; CANO, MARIA ISABEL N.. Biochemical and structural characterization of the RT domain of Leishmania sp. telomerase reverse transcriptase. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-GENERAL SUBJECTS, v. 1867, n. 11, p. 10-pg., 2023-09-28. (19/05958-4, 21/14798-0, 18/04375-2, 19/05239-8)