Interação interespecífica e mecanismos de absorção de vesículas extracelulares com tropismo para células B

• Processo: 22/04146-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 19 de setembro de 2022
• Data de Término da vigência: 18 de setembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Heloisa Sobreiro Selistre de Araújo
• Beneficiário: Bianca Cruz Pachane
• Supervisor: Kenneth W. Witwer
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Johns Hopkins University (JHU), Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 21/01983-4 - Influência de vesículas extracelulares hipóxicas na invasão celular e no microambiente tumoral do Câncer de Mama, BP.DD
• Assunto(s): Vesículas extracelulares Usos terapêuticos Administração farmacêutica Células secretoras de insulina Tropismo medicamentoso
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: B cells | extracellular vesicles | RNA profiling | Vesículas Extracelulares

Resumo

Vesículas extracelulares (EVs) são partículas em nano-escala secretadas por células, que oferecem transporte e armazenamento estável para biomoléculas. Sua estrutura permite sua absorção por outras células, o que torna EVs candidatos potenciais para novas abordagens terapêuticas, particularmente na distribuição de fármacos. Para determinar como EVs atuam em uma abordagem terapêutica, torna-se necessário compreender melhor os mecanismos de organização de carga, processos de interação, dosagem, forma de administração e origem vesicular. Resultados prévios do Laboratório Witwer identificaram um grande envolvimento de leucócitos na depuração de EVs humanas no sangue de primatas não-humanos, com ênfase particular em células B, cuja ação é crítica à resposta imune e expressão de anticorpos. Células B também realizam a manutenção da homeostase, ativação de órgãos linfáticos secundários, desenvolvimento de células T CD4+ e de respostas imunes inflamatórias. EVs são importantes moduladores do sistema imune, auxiliando no transporte de citocinas e fatores de crescimento, apresentação de antígenos e efeitos pleiotrópicos no sistema complemento e na coagulação - majoritariamente devido a sinalização de miRNA. Neste projeto, almejamos compreender os mecanismos moleculares do tropismo de EVs para células B in vitro. Para testar nossa hipótese, pretendemos separar EVs de células em cultura utilizando ultracentrifugação diferencial, em conjunto com filtração e SEC, e posteriormente caracterizá-las conforme as indicações do MISEV2018. Ensaios de interação serão realizados com células de cultura primária de primatas (humanos e não-humanos) por citometria de fluxo de imagem e análise de microscopia confocal. Também sugerimos a utilização de RNAseq e stem-loop RT-qPCR para identificar perfis de miRNA que possam explicar o tropismo de EVs às células B. (AU)