Efeito da tanshinona-IIa-sulfonato de sódio, um inibidor ectostérico de catepsina K, na diferenciação osteogênica de células pulpares e no desenvolvimento da periodontite apical

• Processo: 22/08004-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2027
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Endodontia
• Pesquisador responsável: Gisele Faria
• Beneficiário: Bárbara Roma Mendes
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Periodontite periapical Cavidade pulpar Reabsorção óssea Salvia miltiorrhiza Catepsina K Osteogênese
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células da polpa dental humana | diferenciação osteogênica | Periodontite apical | Reabsorção ossea | Salvia miltiorrhiza | Tanshinona | Efeito na periodontite apical e diferenciação osteogênica de celulas pulpares humanas

Resumo

A Periodontite Apical (PA) se caracteriza pela presença de inflamação e destruição de tecidos mineralizados e não mineralizados periapicais, processos esses que envolvem a produção de citocinas, osteoclastogênese e ação de enzimas, dentre elas a catepsina K (CatK). As tanshinonas, substâncias extraídas da planta Salvia miltiorrhiza, são amplamente empregadas na Medicina tradicional chinesa para tratamento de doenças cardiovasculares, e osteolíticas, como Osteoporose, entre muitas outras. A tanshinona-IIA-sulfonato de sódio (T06), derivado solúvel em água da tanshinona-IIA (TIIA), inibe reabsorção óssea via inibição seletiva da atividade colagenolítica da CatK (inibição ectostérica de Catk), sem interferir em outros sítios ativos da enzima, e não afeta a osteoclastogênese, que são duas propriedades importantes/promissoras de antirreabsortivos ósseos. Outro fator a ser considerado é que a TIIA induz diferenciação osteogênica de células-tronco mesenquimais, mas não se sabe se a T06 apresenta essa propriedade. Os objetivos do estudo são (1) avaliar o efeito da T06 sobre a inflamação e perda óssea em PA induzida experimentalmente em camundongos e (2) avaliar a citocompatibilidade e o efeito da T06 sobre a proliferação, migração, diferenciação osteogênica e odontogênica de células da polpa dental humana (hDPCs) in vitro. Para o estudo in vivo, serão utilizados 40 camundongos C57BL/6, machos, distribuídos em 4 grupos (n=10/grupo): grupo com indução de PA e tratamento com T06; grupo com indução de PA e tratamento com veículo da T06 (água destilada); grupo sem indução da PA e tratamento com T06; grupo sem indução de PA e tratamento com água destilada. Para indução da PA, será realizada abertura coronária, remoção da polpa dos dois primeiros molares inferiores e manutenção da câmara pulpar aberta ao ambiente bucal, por 30 dias. As substâncias serão administradas por gavagem, uma vez ao dia, durante os 30 dias do experimento. Após eutanásia, uma hemi-mandíbula será submetida ao exame em microtomográfico para avaliação do volume da perda óssea periapical e, em seguida, ao processamento histotécnico para análise da inflamação e quantificação de osteoclastos na região periapical. Na hemi-mandíbula remanescente, as raízes do primeiro molar e o osso adjacente serão coletados e preparados para análise da expressão do RNA mensageiro de genes relacionados à inflamação e à osteoclastogênese, por meio de reação da polimerase em cadeia em tempo real quantitativo (RT-qPCR). Para o estudo in vitro, as hDPCs expostas à T06 e não expostas (controle) serão avaliadas empregando diferentes abordagens metodológicas como ensaios de viabilidade, apoptose, proliferação, migração e de análise diferenciação osteogênica e odontogênica. Os testes estatísticos serão escolhidos de acordo com a distribuição e homocedasticidade dos dados, empregando nível de significância de 5%. (AU)