Estudo do efeito de mutações em sítios de ubiquitinação sobre o conteúdo da proteína 'Fator de Transcrição 4'.

• Processo: 22/13085-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Fabio Papes
• Beneficiário: Manuella Munuera Hoff
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia molecular Síndrome de Pitt-Hopkins
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia molecular | genética humana | Síndrome de Pitt-Hopkins | Biologia Molecular

Resumo

A Síndrome de Pitt-Hopkins (PTHS) é uma doença genética rara, pertencente ao grupo de transtornos do espectro autista (TEA), causada por mutações no gene TCF4. Este codifica a proteína 'Fator de Transcrição 4', cujo papel é coordenar a proliferação e diferenciação celular de células progenitoras neurais. As diferentes mutações de novo que ocorrem nos pacientes com PTHS resultam na haploinsuficiência de TCF4, isto é, expressão de apenas uma das cópias do gene, causando a Síndrome. A doença é caracterizada por atraso motor, falta de coordenação motora, ausência de linguagem, deficiência intelectual e movimentos estereotipados e repetitivos. Além da PTHS, polimorfismos no gene TCF4 já foram associados a outras doenças neuropsiquiátricas, incluindo esquizofrenia, transtorno afetivo bipolar, estresse pós-traumático e depressão. Embora associado a inúmeras patologias, pouco é conhecido sobre a biologia da proteína TCF4 e não existem estratégias terapêuticas específicas para PTHS. Tendo em vista que é causada pela expressão insuficiente da proteína TCF4, o aumento da quantidade funcional total da proteína TCF4 nas células torna-se uma possível estratégia terapêutica. Como o processo de degradação proteica pelo sistema ubiquitina-proteassomo é um dos principais mecanismos de redução da quantidade das proteínas nas células, o estudo dos mecanismos de degradação de TCF4 por esse sistema torna-se extremamente relevante para avanços na compreensão deste fator de transcrição e para o desenvolvimento de terapias específicas. No presente projeto, busca-se investigar a relação entre dois sítios preditos de ubiquitinação em TCF4 e a degradação deste componente proteico pela via ubiquitina-proteassomo. Para tanto, conduziremos ensaios de quantificação proteica em células progenitoras neurais superexpressando proteínas TCF4 portando mutações sítio-dirigidas nestes sítios de ubiquitinação, seguido da avaliação do impacto das mutações sobre o conteúdo e localização subcelular de TCF4, permitindo inferir se tais sítios controlam a degradação desta proteína pelo proteassomo.