Identificação de E3 ligases parceiras de interação da enzima conjugadora de ubiquitina UBE2A

• Processo: 22/13424-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Ângela Saito
• Beneficiário: Estefanny Guimarães de Abreu
• Instituição Sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Deficiência intelectual Interação proteína-proteína Ubiquitinação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Deficiencia intelectual | E3 ligases | interação entre proteínas | Ube2A | ubiquitinação | Doenças neuronais

Resumo

A ubiquitinação é uma modificação pós-traducional envolvida em vários processos celulares, como mitofagia, reparo de dano ao DNA, degradação de proteínas pelo sistema ubiquitina-proteassomo e transmissão sináptica. Sabe-se que a UBE2A, uma enzima conjugadora de ubiquitina (E2), pode desempenhar essas funções descritas interagindo com outras proteínas, como as E3 ligases RAD18 e Parkin. Devido às funções celulares dependentes da ação de UBE2A, mutações no seu gene estão relacionadas a diversas doenças, como alguns cânceres, doenças neurodegenerativas e à Deficiência Intelectual (DI) de herança ligada ao X do tipo Nascimento. Estudos preliminares demonstraram que a mutação Q93E na UBE2A, encontrada em uma família brasileira com a DI do tipo Nascimento, está associada às alterações na citoarquitetura neuronal e na transmissão sináptica. Contudo, não há conhecimento dos mecanismos celulares e moleculares que levam a essas alterações e dos parceiros de interação envolvidos, em especial E3 ligases que atuam em conjunto com a UBE2A. Assim, o objetivo desse projeto é identificar as possíveis E3 ligases parceiras de UBE2A em células neuronais utilizando o método do TurboID e espectrometria de massas. Após identificar os candidatos, serão realizados validação e estudos funcionais com estes, como imunoprecipitação seguida de Western Blot e PLA (Proximity Ligation Assay). Desse modo, este projeto contribuirá para o melhor entendimento dos mecanismos moleculares associados à síndrome de deficiência de UBE2A em pacientes com DI.