Implicações da sinalização apelinérgica sobre o transporte renal de sódio e água: papel da isquemia/reperfusão

• Processo: 22/05371-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Maria Oliveira de Souza
• Beneficiário: Guilherme Lopes Gonçalves
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Fisiopatologia renal Isquemia Traumatismo por reperfusão Transporte de sódio Apelina Aquaporina 2 Lesão renal aguda
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Apelina-13 | Aquaporina-2 | Isquemia | Receptor APJ | Reperfusão Renal | Transporte de sódio | Fisiopatologia renal

Resumo

O sistema apelinérgico apresenta um papel essencial na fisiologia cardiovascular e no balanço hidroeletrolítico, e tem sido alvo de recentes estudos envolvendo os rins. As apelinas são peptídeos endógenos que interagem com o receptor APJ acoplado à proteína G e exercem efeitos na hemodinâmica glomerular, assim como na função tubular. Recentemente a ativação do sistema apelinérgico tem sido descrita como uma possível alternativa para atenuar os efeitos deletérios da lesão renal aguda (LRA) decorrente de isquemia/reperfusão (I/R) renal, uma condição hospitalar comum que resulta em alta taxa de mortalidade, podendo estar associada à episódios de sepse, choque, intervenções cirúrgicas cardiovasculares ou transplantes. Mesmo assim, considerando a contribuição das apelinas, o papel dos transportadores de sódio e água no contexto fisiológico, como também na LRA decorrente de I/R ainda não é claro. Dessa forma, nosso objetivo é investigar os efeitos da via de sinalização ativada por apelina-13 sobre o transporte de sódio e água, em contexto fisiológico e fisiopatológico, utilizando abordagens in vitro e in vivo. Para isso linhagens de células tubulares proximais (IRPTC), do segmento espesso ascendente da alça de Henle (ST-1), de túbulo contorcido distal (209/MDCT) e do ducto coletor (MDCK) serão tratadas com apelina-13 (em concentração padronizada) por 30 min e 24 h. No modelo animal de I/R será avaliada a influência do tratamento prévio com apelina-13 em camundongos submetidos à isquemia renal bilateral por 30 min e eutanasiados após 48h de reperfusão, considerando a função renal, clearance de creatinina e excreção de sódio. A atividade do trocador sódio/hidrogênio isoforma 3 (NHE3), como também do cotransportador NKCC2 será avaliada por microscopia de fluorescência. A expressão de proteínas será analisada por western blotting. Por imunofluorescência será investigado a localização e expressão dos transportadores de sódio, assim como a via de reabsorção de água mediada por aquaporina 2 (AQP2) por imunoprecipitação. Com os resultados do projeto esperamos estabelecer uma melhor compreensão dos mecanismos moleculares envolvidos no sistema apelinérgico renal como também novas possibilidades para o tratamento das doenças renais. (AU)