Associação da proteína KSRP com microRNAs relacionados à sobrevivência e função da célula beta pancreática

• Processo: 22/04088-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Helena Cristina de Lima Barbosa
• Beneficiário: Juliana Oriel de Oliveira
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Células secretoras de insulina Secreção de insulina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: célula beta pancreática | Khsrp | Ksrp | Secreção de Insulina | Fisiologia Endócrino

Resumo

O DM tipo 1 é decorrente de fatores genéticos que levam à destruição das células beta do pâncreas pelo sistema imunológico, provocando uma deficiência severa na produção de insulina. O DM tipo 2 é caracterizado pelo déficit na produção de insulina associado à resistência insulínica. A produção e a secreção de insulina são as principais funções das células beta pancreáticas. Após aumento da concentração plasmática de glicose, a célula beta recebe estímulo para síntese de insulina. A secreção do grânulo de insulina da célula-beta requer o remodelamento do citoesqueleto, dependendo de Cdc42 e Rac1. A ligação de proteínas SNARE da vesícula com SNAREs presentes na membrana plasmática permite a fusão do grânulo à membrana, o que resulta na exocitose da insulina da célula beta. Durante a obesidade, com a crescente demanda da produção de insulina, observa-se inicialmente um aumento na massa de células beta das ilhotas pancreáticas. A manutenção da hiperinsulinemia provoca a disfunção das células beta, e a progressão do estado de obesidade para o pré-diabético leva à perda de massa dessas células, que é acentuada no estabelecimento do DM tipo 2. A apoptose das células beta pode ser causada tanto por estresse oxidativo quanto por estresse de retículo endoplasmático. A KSRP é uma proteína que promove o decaimento de mRNA e a maturação de miRNAs. A inibição ou o aumento da atividade de KSRP podem interferir no funcionamento de uma série de miRNAs ou mRNAs, aumentando ou diminuindo a expressão gênica pós-transcricional, direcionando, portanto o funcionamento celular. O objetivo deste trabalho é caracterizar a função da proteína KSRP em modelo in vitro (células INS-1E) e ex vivo (ilhotas isoladas) de knockdown (KD) lentiviral e modelo de superexpressão da KSRP. Após a obtenção de modelos KD da KSRP em ilhotas pancreáticas, será feito miRNA qPCR Panel, em todos os grupos experimentais; a superexpressão de KSRP será feita por meio da transfecção de plasmídeo de KSRP ligado a EGFP em células INS-1E. Nos modelos KD para KSRP, de superexpressão de KSRP e de células INS-1E ou ilhotas submetidas à condições estressoras (alta glicose e exposição ao palmitato), serão avaliadas possíveis variações na expressão de alguns microRNAs especificamente relevantes para a célula beta (let-7a, miR-7, miR-9, miR-21, miR-15a, miR-29a/b, miR-96, miR-124, miR-148, miR-200 e miR-375). Este projeto irá contribuir para o melhor entendimento da função da ilhota pancreática e, portanto, o desenvolvimento de estratégias terapêuticas mais eficientes para o tratamento do diabetes mellitus.