Impactos de LsfA, uma 1-Cys Prx de Pseudomonas aeruginosa, na sinalização inflamatória de macrófagos.

• Processo: 23/02058-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Luis Eduardo Soares Netto
• Beneficiário: Rogério Luis Aleixo Silva
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/07937-8 - Redoxoma, AP.CEPID
• Assunto(s): Inflamação Macrófagos Mediadores lipídicos Resposta inflamatória
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Inflamação | LsfA | Macrófagos | Mediadores Lipídicos | peroxirredoxina | Resposta inflamatoria

Resumo

Macrófagos são frequentemente a primeira linha de defesa do organismo contra patógenos invasores. Além da produção de moléculas capazes de combater os patógenos, como ROS (reactive oxygen species) e RNS (reactive nitrogen species), produzem diversas moléculas sinalizadoras, dentre elas os mediadores lipídicos relacionados a inflamação e/ou resolução, como os SPMs (specialized pro-resolving mediators), cuja formação envolve diversos peróxidos e moléculas relacionadas ao metabolismo redox, como glutationa. Peroxirredoxinas são enzimas amplamente distribuídas entre os mais variados grupos filogenéticos, com uma eficiente atividade antioxidante, relacionadas com diversas funções celulares. LsfA pertence a um sub grupo das peroxirredoxinas que utiliza apenas um resíduo de cisteína em seu ciclo catalítico. Além do seu envolvimento com a virulência de Pseudomonas aeruginosa, nosso grupo descreveu recentemente a capacidade dessa proteína bacteriana alterando os níveis de mediadores lipídicos em macrófagos do tipo M1 e M2. Com isso, o plano de atividades envolvera experimentos que compreendem o estabelecimento de culturas de células THP-1, diferenciadas para macrófagos do tipo M1 e M2 que serão co-incubados com linhagens de Pseudomonas aeruginosa (PA14) selvagem e com LsfA deletada. Utilizando probes geneticamente codificados, será feita a detecção dos níveis de peroxido de hidrogênio e glutationa nos diferentes macrófagos durante a co-incubação com as diferentes linhagens de P. aeruginosa, afim de compreendermos se essa proteína bacteriana interfere nos níveis dos mediadores lipídicos dos macrófagos por meio da alteração dos níveis oxidativos dos macrófagos.