Estudo sobre o papel dos processos infecciosos na hepatotoxicidade induzida por células iNKT

• Processo: 23/01439-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: Alexandre de Castro Keller
• Beneficiário: Juliana da Luz Labate
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Fígado Hepatite Hepatócitos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: fígado | hepatite | hepatócitos | Nkt | Imunologia Celular

Resumo

Devido à sua estrutura anatômica, a homeostasia do fígado depende da tolerância aos derivados da microbiota e da imunidade à patógenos. Nesse sentido, diversos estudos destacam a participação das células T invariantes Natural Killer (iNKT) na fisiopatologia de doenças hepáticas mediadas pelo sistema imunológico. Essas células constituem um grupo de linfócitos T não convencionais, com seletividade a glicolipídeos expressos na molécula CD1d, possuem alto potencial imunomodulador e, ao contrário dos linfócitos T convencionais, são residentes em diversos tecidos, incluindo o fígado. Como já foi descrito que o controle da atividade biológica das iNKTs hepáticas está relacionado com a expressão de CD1d nos hepatócitos, nossa hipótese é que processos infecciosos possam alterar tanto a sua expressão na superfície dessas células quanto o tipo de antígeno naturalmente reconhecido pelas iNKTs. Dessa forma, a presente proposta tem como objetivo avaliar in vitro o processo de hepatotoxicidade mediada pelas iNKTs frente a estímulos associados com processos infecciosos bacterianos (LPS) e virais (poly I:C). Para tanto, serão utilizadas linhagens de células hepáticas (AML12 e Hepa-1c1c7) e de iNKTs (hibridoma DN3a4-1.2). Como parâmetros experimentais analisaremos: a hepatotoxicidade por ensaios de viabilidade celular (LDH, cristal violeta, citometria de fluxo e quantificação de pCaspase 3-7 por Western Blot); expressão de CD1d, Fas e TRAIL em hepatócitos por citometria de fluxo e PCR em tempo real; e expressão nos hepatócitos de transcritos associados com o metabolismo de lipídeos como Ugcg, B4galt6, LacCer, entre outros. Além de contribuir para o entendimento sobre os processos de hepatotoxicidade mediada pelas iNKTs e caracterização de possíveis marcadores de prognóstico ou de intervenção, o projeto é parte essencial no processo de formação científica e profissional da aluna envolvida.