Avaliação dos mecanismos moleculares de Natterina-like XP_017212453.1 que facilitam a ativação do inflamassoma em larvas de zebrafish

• Processo: 23/10147-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biologia Geral
• Pesquisador responsável: Carla Lima da Silva
• Beneficiário: Darlan Gusso
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/07467-1 - CeTICS - Centro de Toxinas, Imuno-Resposta e Sinalização Celular, AP.CEPID
• Assunto(s): Proteína 9 associada à CRISPR Repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente espaçadas Genética Imunidade inata Peixe-zebra
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cas9 | Crispr | genética | imunidade inata | natterina ou natterina-like | perda de função genica | Zebrafish | Genetica

Resumo

A família Natterina foi identificada no veneno de Thalassophryne nattereri, a qual foi ampliada pela inclusão de 331 espécies que apresentam 859 genes natterina ou natterina-like. Estes não tem ortólogos em mamíferos, mas sim em peixes. Entre as 109 espécies de peixes que apresentam um ou mais genes, o zebrafish (Danio rerio) possui 10 que codificam 11 proteínas. Embora as muitas funções biológicas para as Natterina-like permaneçam sem caracterização, estudos demonstram seu papel como moléculas efetoras da imunidade inata. Recentemente mostramos que a Natterina-like codificada pelo gene loc795232 exerce a função de molécula de defesa contra patógenos bacterianos, provocando a ativação do complexo inflamassoma. Demonstramos que as larvas depletadas por CRISPR/Cas9 do gene loc795232 são mais suscetíveis à morte por S. aureus e por S. typhimurium enquanto as larvas sobreviventes apresentam alterados padrões de atividade locomotora em resposta à infecção. A maior suscetibilidade à infecção nas larvas depletadas está associada à expressão deficiente de caspase-a e caspase-b maduras. Dada a sua conservação evolutiva, sua ampla expressão em tecidos envolvidos na imunidade e seu papel no desenvolvimento, consideramos a hipótese de que membros desta família, especificamente a Natterina-like codificada por loc795232 pode estar envolvida na co-regulação de uma via que afeta a capacidade dos sensores do inflamassoma de responder ou de retransmitir sinais para a proteína adaptadora ASC e consequentemente ativar as pro-caspases. Neste projeto, nosso objetivo é avaliar a função específica da Natterina-like XP_017212453.1 codificada por loc795232 como molécula capaz de interação com sensores citosólicos críticos para ativação do inflamassoma.