Identificação de fatores quimiotáticos responsáveis pelo controle migratório de células hiPSCs-NPC em modelo 3D bioimpresso

• Processo: 23/14105-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2024
• Data de Término da vigência: 01 de março de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Marimélia Aparecida Porcionatto
• Beneficiário: Natália Heloísa de Oliveira
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 18/12605-8 - Desenvolvimento de microplataformas brain-on-a-chip para modelagem do sistema nervoso central in vitro, AP.TEM
• Assunto(s): Bioimpressão Fatores quimiotáticos Migração Neurodesenvolvimento Neurobiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bioimpressão | Fatores quimiotáticos | hiPSC | migração | neurodesenvolvimento | neuroprogenitores | Neurobiologia

Resumo

O difícil acesso a tecidos humanos e as diferenças consideráveis observadas entre o córtex humano e de outros mamíferos evidenciam a necessidade da produção de modelos in vitro que recapitulem as etapas iniciais do desenvolvimento cortical humano. Por meio da distribuição de células e biomateriais, a bioimpressão 3D permite a construção de microambientes que dão suporte para as interações célula-célula e célula-matriz, sendo capaz de promover a proliferação e a migração de neuroprogenitores. Neste contexto, este projeto tem como objetivo principal identificar os fatores quimiotáticos responsáveis pelo controle migratório de neuroprogenitores derivados de células pluripotentes induzidas humanas (hiPSC-NPCs) e suas vias de sinalização em modelo 3D bioimpresso. A expressão de genes codificantes para fatores quimiotáticos importantes para a migração cortical será aferida por meio análise de expressão gênica por RT-PCR, a e presença de fatores quimiotáticos secretados no meio de cultivo será constatada por meio do ensaio de ELISA. Complementarmente, a presença dos receptores específicos para os fatores identificados será observada por meio análise de imunofluorescência. O papel dos fatores quimiotáticos CXCL12, Sema3A e PROK2 na migração de NPCs será aferido por meio da inibição farmacológica dos receptores e vias de sinalização e microscopia em time-lapse.