Construção de vetor para expressão ectópica induzível da proteína LMP1 do vírus de Epstein-Barr para estudo das propriedades oncovirais em células humanas cultivadas in vitro

• Processo: 24/00937-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Deilson Elgui de Oliveira
• Beneficiário: Anderson Valim Pereira
• Instituição Sede: Instituto de Biotecnologia (IBTEC). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Transformação celular viral Clonagem Cultura de células Modelo experimental Biotecnologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Carcinogênese Viral | clonagem | cultura de células | modelos experimentais | tecnologia do DNA recombinante | vetores de expressão | Biotecnologia

Resumo

Os cânceres constituem uma preocupação global de saúde, com impactos significativos em termos de morbidade e mortalidade, particularmente em adultos mais velhos. O envelhecimento populacional e a elevada prevalência de hábitos de vida nocivos têm causado expectativa de aumento na incidência de cânceres em todo o mundo. Alguns cânceres humanos estão associados a agentes infecciosos, particularmente as doenças mais incidentes em países em desenvolvimento. Dentre os agentes infecciosos reconhecidamente cancerígenos para humanos destaca-se o vírus de Epstein-Barr Virus (EBV), que infecta de modo latente mais de 90% da população adulta e cuja infecção contribui na patogênese de diversos cânceres humanos, particularmente a forma endêmica o Linfoma de Burkitt e a forma indiferenciada do carcinoma de nasofaringe. Este trabalho visa o desenvolvimento de vetores recombinantes para a expressão regulada da proteína LMP1 do EBV em células humanas cultivadas in vitro, a fim de fomentar o estudo das propriedades oncogênicas desse produto viral. Serão gerados construtos para expressão induzível de LMP1 proveniente dos genótipos Akata e M81 do EBV empregando técnicas de clonagem. Após validados, os construtos serão empregados para estabelecimento de modelos experimentais baseado na expressão de EBV LMP1 induzível por tetraciclina, de maneira dose-dependente. Ao final deste projeto espera-se que os vetores para expressão induzível de EBV LMP1 tenham sido validados em termos estrutural e funcional, de modo que poderão ser empregados na investigação dos impactos e mecanismos moleculares de atividade da oncoproteína viral em diferentes condições experimentais. Essa ferramenta pode contribuir na elucidação da patogênese de cânceres associados ao EBV, oportunizando a identificação de alvos moleculares para estratégias baseadas na inibição dessas propriedades para o tratamento de cânceres associados ao vírus.