Geração e caracterização fenotípica de mutantes de Leishmania para estudos da plasticidade genômica sob stress replicativo

• Processo: 24/07588-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Luiz Ricardo Orsini Tosi
• Beneficiário: Heloisa Berti Gabriel
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 23/03015-0 - Da epigenética, variabilidade genômica e regulação da expressão gênica em Leishmania, AP.TEM
• Assunto(s): Instabilidade genômica Leishmania Biologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Estresse replicativo | instabilidade genômica | leishmania | Biologia Molecular

Resumo

O presente estudo está contido na proposta de estudar a variabilidade do genoma de Leishmania em resposta ao estresse replicativo. Os trabalhos visam a utilização de abordagens no estado-da-arte em genética molecular e biologia celular, como na edição genômica por CRISPR/Cas9 e ou em protocolos de citometria de fluxo. A partir do uso destas ferramentas investigaremos o papel de dois fatores centrais na resposta celular a estresses genotóxicos, a quinase ATM, no topo da sinalização de quebras na estrutura dupla-fita do DNA, e a proteína Rad1, subunidade do complexo 9-1-1, fator de checkpoint do ciclo celular, ativado no início da resposta a estresse no processo de replicação de DNA.O estudo visa ainda selecionar mutantes expostos a estresse replicativo para caracterização da plasticidade do genoma em termos da alteração de números e cópias, acúmulo de mutações e rearranjos cromossïmicos em células deficientes para os fatores ATM e Rad1 mencionados acima.