Estudo da participação da CaMKII nas alterações comportamentais e moleculares em camundongos iNOS knockout

• Processo: 24/05428-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Neuropsicofarmacologia
• Pesquisador responsável: Sabrina Francesca de Souza Lisboa
• Beneficiário: Thales Andrade da Silva
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/19731-6 - Identificação de mecanismos epigenéticos induzidos por estresse que modulam a sinalização endocanabinóide e a resposta neuroimunológica como novos alvos farmacológicos no tratamento do transtorno de estresse pós-traumático (PTSD), AP.JP
• Assunto(s): Óxido nítrico Sistema endocanabinoide Transtornos de estresse pós-traumáticos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: CaMKII | Medo Condicionado contextual | Oxido Nitrico | sistema endocanabinóide | transtorno de estresse pós-traumático | Neuropsicofarmacologia

Resumo

Estímulos estressores são pontos chave na patogênese de transtornos psiquiátricos como o Transtorno do Estresse Pós-traumático (TEPT). As isoformas da enzima óxido nítrico sintetase (NOS) neuronial (nNOS), induzível (iNOS) e endotelial (eNOS), são responsáveis pela produção de óxido nítrico (NO), fator crítico em respostas de medo. No SNC, a principal síntese de NO ocorre a partir da nNOS, através de estímulos como o estresse. Estes estímulos também ativam o sistema endocanabinoide (eCB), modulando fenótipos comportamentais. Estudos anteriores do nosso grupo demonstraram que camundongos com a deleção do gene para iNOS (iNOS knockout) apresentaram maior dificuldade na extinção de memórias no protocolo de medo condicionado ao contexto (MCC) e desregulação no sistema eCB no córtex pré frontal (CPF) devido a aumento na expressão de nNOS, sugerindo que este modelo animal pode ser utilizado para o estudo de TEPT e envolvimento de NO em características deste transtorno. Estudos recentes do nosso grupo também evidenciam o papel de receptores vaniloides do tipo 1 (TRPV1) na extinção do medo em animais iNOS knockout, com a inibição destes receptores atenuando parte dos déficits observados. A enzima calmodulina quinase II (CaMKII) pode sofrer nitrosilação pelo NO, e pode estar envolvida na sensibilização de TRPV1 em animais iNOS KO, através da sua fosforilação. Desta forma, este estudo tem como objetivo investigar se a CaMKII é ativada por nitrosilação e sensibiliza os receptores TRPV1 no CPF medial dos animais iNOS KO, alterando o fenótipo observado. Para tal, avaliaremos a expressão e ativação de CaMKII por nitrosilação e a fosforilação de TRPV1 no CPF de animais WT e iNOS KO submetidos ao MCC. A seguir, um inibidor reversível dessa enzima (KN-93) será administrado diretamente no CPFm para observar se é capaz de atenuar as alterações observadas.