Seleção e análise funcional de lncRNAs sob efeito de metilação de DNA envolvidos na progressão tumoral em modelo de dormência imunomediada

• Processo: 23/17620-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2024
• Situação: Interrompido
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Miriam Galvonas Jasiulionis
• Beneficiário: Ianca Rosa Dias
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/20841-4 - Investigação de lncRNAs e redes gênicas reguladoras moduladas pelo 5-Aza-2´-desoxicitidina em um modelo murino de despertar imunomediado de células de melanoma dormentes, BE.EP.MS
• Assunto(s): Epigenômica lncRNAs Melanoma Metilação de DNA Progressão tumoral Biologia tumoral
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: dormência tumoral | epigenética | lncRNAs | melanoma | Metilação do DNA | progressão tumoral | Biologia do Câncer

Resumo

O melanoma cutâneo é uma neoplasia maligna tipicamente agressiva devido a sua alta capacidade metastática. O processo causal é multifacetado, podendo ter contribuições genéticas, fenotípicas e ambientais. A exposição à luz ultravioleta é o principal fator de risco para o desenvolvimento da doença por conta de seu alto potencial mutagênico no material genético celular. Além de mutações permanentes no genoma, existem alterações epigenéticas que também vem sendo associadas ao desenvolvimento e progressão tumoral em múltiplos tipos de neoplasias malignas. Um tipo de modulação epigenética advém das sequências longas não codificantes de RNA, ou long non-coding RNAs (lncRNAs), que são especialmente importantes por sua capacidade de gerar estruturas secundárias e interagir com o genoma regulando a expressão gênica antes, durante e depois da transcrição. Outra marca epigenética importante é a metilação do DNA, que está diretamente relacionada com o fenótipo que será assumido naquela célula. Quando associadas ao câncer, essas marcas, em sua maioria, envolvem a ativação de oncogenes ou a repressão de genes supressores de tumor. Em se tratando da manutenção e progressão tumoral, sabe-se que o papel do microambiente é crucial; principalmente por sua capacidade de corromper e orquestrar processos fisiológicos, visando uma diferenciação fenotípica celular mais migratória e flexível. Como muitas vezes o sistema imunológico facilita e, frequentemente, contribui com a disseminação tumoral, compreende-se que, quando há um "empate" entre a resposta imune e as células neoplásicas, o mesmo pode se manter em estado de dormência tumoral (imunomediada) e qualquer distúrbio tendendo para alguns dos lados pode desencadear a retomada do processo tumorigênico, ou a anulação dele. Nosso laboratório possui um modelo celular bem estabelecido da progressão tumoral consistindo de melanócitos (melan-a) a células de melanoma não metastáticas e metastáticas - chamadas 4C11- e 4C11+, respectivamente. E também, um modelo de dormência tumoral imunomediada, através da injeção de uma dose subtumorigênica (103 células) de células de melanoma em conjunto com um grande número de células apoptóticas. Assim, dois grupos de camundongos foram submetidos à injeção de uma dose tumorigênica (2.105 células) ou a co-injeção pelo modelo de dormência (103 células de melanoma + 106 células apoptóticas), sendo que metade dos animais de cada grupo não foi tratado e metade, tratado com um agente desmetilante (5azaCdR). Os tumores coletados desses grupos foram submetidos à extração de DNA e RNA para análises, respectivamente, do metiloma e transcriptoma. Os dados obtidos serão avaliados quanto a lncRNAs cuja expressão e metilação tenham sido alterados pelo tratamento com o agente desmetilante, visando a seleção de lncRNAs relacionados à promoção tumoral sob ação da metilação do DNA para estudos funcionais in vitro e in vivo. Este estudo poderá revelar lncRNAs regulados epigeneticamente com papel na progressão tumoral e no despertar de células de melanoma dormentes, que podem ser futuros alvos terapêuticos.