Desenvolvimento de um protocolo para isolamento e identificação de toxinas de serpentes em amostras de plasma de pacientes envenenados no Brasil

• Processo: 24/14131-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2025
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Rui Seabra Ferreira Junior
• Beneficiário: Joeliton dos Santos Cavalcante
• Supervisor: Alejandro Alagon
• Instituição Sede: Centro de Estudos de Venenos e Animais Peçonhentos (CEVAP). Centro Virtual de Toxinologia. Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), México
• Vinculado à bolsa: 22/16060-1 - Dos mecanismos aos biomarcadores de envenenamento por serpentes brasileiras: um estudo multicêntrico para o desenvolvimento de estratégias em diagnóstico e monitoramento, BP.DR
• Assunto(s): Biomarcadores Doenças negligenciadas Venenos de serpentes Proteômica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biomarcadores | ciência translacional | doenças negligenciadas | proteômica clínica | venenos de serpentes | Venômica clínica | Proteômica

Resumo

A complexidade dos envenenamentos por serpentes torna o diagnóstico um grande desafio na prática clínica. Ao empregar proteômica de última geração no plasma sanguíneo de pacientes envenenados por serpentes com diferentes condições clínicas, estamos explorando os mecanismos envolvidos na fisiopatologia do envenenamento. Porém, a dificuldade em diferenciar acidentes causadas por diferentes espécies quando a serpentes não é identificada, como nos casos de envenenamentos por Bothrops moojeni e Crotalus durissus terrificus, é um obstáculo. A presença de manifestações comuns, como edema e alterações de coagulação, em ambos os casos, dificulta a identificação do tipo de acidente nas regiões onde ocorre a sobreposição dessas espécies, podendo levar a diagnósticos e acompanhamentos falsos negativos. Esta incerteza leva a atrasos no tratamento com o antiveneno, período em que a doença pode progredir de leve para moderada ou grave. A necessidade de monitorar os níveis de creatina quinase nas primeiras 12 horas para diferenciar as envenenamentos e o início tardio das manifestações neurológicas nos casos de Crotalus são exemplos de como o diagnóstico diferencial pode ser desafiador. Esse atraso pode resultar em complicações clínicas mais graves, necessidade de maior número de frascos de antiveneno e aumento do risco de reações adversas. A presente proposta visa desenvolver um protocolo para isolamento e identificação de toxinas circulantes em amostras de pacientes envenenados por serpentes no Brasil, além de realizar a quantificação das principais famílias de toxinas presentes nas amostras no momento da internação hospitalar. Utilizaremos amostras de plasma de pacientes envenenados por B. atrox, B. moojeni e C. d. terrificus e empregaremos uma abordagem multidisciplinar utilizando ensaios ELISA, acoplamento de anticorpos a Dynobeads e isolamento de toxinas das amostras, espectrometria de massa e bioinformática. Esta colaboração entre o Centro de Estudos de Venenos e Animais Peçonhentos da Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (CEVAP/UNESP) e a Universidade Nacional Autônoma do México permitirá o desenvolvimento de um protocolo inovador para identificação de toxinas em amostras clínicas, aprofundando a compreensão da variabilidade venômica e seus impactos clínicos. Os resultados gerados a partir deste plano de atividades no exterior e realizado no âmbito do projeto de Doutorado Regular FAPESP Proc. 2022/16060-1, além de gerar candidatos a biomarcadores para o diagnóstico de envenenamento por serpentes, permitirá a produção de kits diagnósticos mais precisos e a compreensão dos mecanismos que levam às diferentes manifestações clínicas. Por fim, a troca de conhecimentos durante o período permitirá uma primeira capacitação, teste de instrumentos de pesquisa e modelos de análise, abrindo caminho para uma proposta de cooperação internacional com o objetivo de continuidade dos estudos.