Desenvolvimento de um ensaio de imunossupressão in vitro utilizando células T regulatórias naturais e induzidas para avaliação funcional de células CAR-T

• Processo: 24/17902-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Lucas Eduardo Botelho de Souza
• Beneficiário: Raissa Raminelli Rezende
• Instituição Sede: Hemocentro de Ribeirão Preto. Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da USP (HCMRP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Linfócitos T reguladores Oncologia Terapia baseada em transplante de células e tecidos Técnicas de transferência de genes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Car-T | Células T regulatórias | Oncologia | Produtos medicinais de terapia avançada | terapia celular | transferencia genica | Terapia celular avançada

Resumo

A transferência adotiva de linfócitos T modificados para expressar receptores quiméricos de antígeno (CAR) tem apresentado taxas de remissão completa impressionantes contra neoplasias de células B. Contudo, a eficácia dos linfócitos CAR-T contra tumores sólidos, que constituem a maioria das neoplasias, ainda é limitada. Isso ocorre porque o microambiente dos tumores sólidos é denso e decorado com células e moléculas imunossupressoras, o que dificulta a infiltração e a atividade citolítica das células CAR-T. Os modelos atuais amplamente disponíveis para avaliar a atividade antitumoral de células CAR-T são baseados em animais imunodeficientes ou em cocultivo apenas com células tumorais, o que não recapitula os obstáculos associados à imunossupressão. Assim, é necessário desenvolver plataformas de teste que incluam elementos imunossupressores para desafiar a performance das células CAR-T, como as células T regulatórias (Tregs), as quais são associadas ao mau prognóstico em pacientes com glioblastoma. Portanto, o objetivo deste projeto é determinar as quantidades relativas de células Treg naturais ou induzidas via expressão ectópica de Foxp3 (iTreg) capazes de suprimir a resposta antitumoral de células CAR-T anti-GD2 contra células de glioblastoma in vitro. Para isso, serão realizados ensaios de cocultivo entre células CAR-T, células de glioblastoma T98G e diferentes proporções de células Treg ou iTreg. A supressão da atividade antitumoral será determinada pela quantificação da bioluminescência emitida pelas células tumorais. O efeito imunossupressor direto sobre as células CAR-T será avaliado por ensaio de supressão da proliferação via marcação com CFSE e pela quantificação da liberação das citocinas imunossupressoras IL-10 e TGF-¿ nos sobrenadantes dos cocultivos. Esperamos que este projeto resulte na criação de uma plataforma para avaliar estratégias que tornem células CAR-T resistentes à imunossupressão causada por células Treg e, em última instância, contribua para elevar sua eficácia terapêutica contra tumores sólidos.