DREAM e a disfunção do tecido adiposo perivascular na obesidade

• Processo: 24/06637-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Cardiorenal
• Pesquisador responsável: Rita de Cassia Aleixo Tostes Passaglia
• Beneficiário: Victor Oliveira Assis
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/08216-2 - CPDI - Centro de Pesquisa em Doenças Inflamatórias, AP.CEPID
• Assunto(s): Inflamação Obesidade
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: A20 | Dream | Inflamação | obesidade | Pvat | Farmacologia Cardiovascular

Resumo

A obesidade é uma epidemia global associada a uma série de complicações cardiovasculares, incluindo a disfunção do tecido adiposo perivascular (PVAT), que desempenha papel crucial na modulação de respostas vasoconstritoras. Durante a obesidade, o PVAT sofre alterações patológicas, caracterizadas por aumento na produção de moléculas vasoconstritoras e pró-inflamatórias, bem como pela redução do seu efeito anti-contrátil. A inflamação, que envolve a infiltração de células imunes, desempenha papel central na disfunção do PVAT. O DREAM (Downstream Regulatory Element Antagonist Modulator) é conhecido por ser um repressor transcricional que regula a inflamação em contextos patológicos. DREAM inibe a transcrição do gene anti-inflamatório A20, o qual é capaz de inibir a ativação do complexo NF-¿B. Em situações fisiopatológicas, o aumento da atividade repressora do DREAM intensifica mecanismos pró-inflamatórios. Todavia, seu papel na disfunção do PVAT durante a obesidade permanece desconhecido. O objetivo deste trabalho é investigar se o DREAM contribui com a inflamação no PVAT e, consequentemente, com a sua disfunção durante a obesidade. Nossa hipótese é que na obesidade, ocorre aumento da atividade de DREAM, favorecendo a ativação de vias pro-inflamatórias e perfil pro-inflamatório do PVAT, com consequente disfunção vascular. Camundongos C57BL/6J (WT), nocaute total para DREAM (DREAM-KO) e animais com deleção do DREAM somente em adipócitos (AdiponectinaCreDREAMfl/fl) com 8 semanas de idade serão tratados com dieta hiperlipídica por 16 semanas. A função vascular será avaliada em estudos de reatividade com aortas torácicas com e sem PVAT. A atividade do DREAM será inferida por Western-Blot, qRT-PCR e imunoprecipitação da cromatina. Como mecanismos efetores, o aumento da expressão de moléculas de adesão, a ativação de NF-¿B, a presença de infiltrado de células imunes, e a produção de citocinas serão avaliados por Western Blot, citometria de fluxo e ELISA, respectivamente. O sobrenadante da cultura de adipócitos (controle e submetidos a silenciamento do DREAM por siRNA) incubados com palmitato será utilizado para estimular culturas de células endoteliais e musculares lisas a fim de verificar se o DREAM, em adipócitos, está envolvido na disfunção de outras estruturas vasculares; a produção de citocinas pró- e anti-inflamatórias será determinada por ELISA. Para determinar se o infiltrado inflamatório ocorre em outros depósitos de gordura, a morfologia tecidual e a presença de células imunológicas em amostras de gordura visceral, subcutânea e subescapular de camundongos obesos WT, DREAM-KO e AdiponectinaCreDREAMfl/fl serão avaliadas por técnicas histológicas. O objetivo é elucidar se (e como) o DREAM regula diretamente alvos inflamatórios no PVAT durante a obesidade. A identificação de mecanismos pelos quais o DREAM influencia o processo inflamatório no PVAT poderá fornecer alicerces essenciais para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas destinadas a modular a inflamação e, assim, aprimorar a saúde vascular, não apenas em cenários relacionados à obesidade, mas também em outras condições marcadas por processos inflamatórios.