AVALIAÇÃO DA PRODUÇÃO DESREGULADA DE MUCINAS COMO RESPOSTA ÀS INFECÇÕES DE CEPAS DE ESCHERICHIA COLI ENTEROPATOGÊNICA ATÍPICA (aEPEC)

• Processo: 24/21847-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 23 de janeiro de 2025
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Tânia Aparecida Tardelli Gomes do Amaral
• Beneficiário: Juan Josue Puño Sarmiento
• Supervisor: Vivek Malhotra
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Centre For Genomic Regulation, Espanha
• Vinculado à bolsa: 22/12006-2 - Papel das citocinas na modulação da indução a produção de muco por cepas de Escherichia coli enteropatogênica atípica (aEPEC) em células intestinais in vitro, BP.PD
• Assunto(s): Cálcio Citocinas Escherichia coli enteropatogênica atípica Muco Virulência Patogenicidade bacteriana
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cálcio | citocina | EPEC atípica | Mucina | Muco | Patogenicidade | Patogenicidade Bacteriana

Resumo

O entendimento do papel principal das células caliciformes era restrito apenas à produção de mucinas; no entanto, esse conceito mudou drasticamente devido à descoberta de populações de células caliciformes exercendo funções metabólicas e de defesa, o que as posiciona atualmente como os atores centrais na homeostase intestinal. A função alterada dessas células secretoras poderia levar à formação de uma barreira de muco disfuncional, que é essencial para a prevenção de doenças. Há uma falta de conhecimento do efeito produzido por patógenos entéricos na funcionalidade das células caliciformes, o que poderia contribuir para o desenvolvimento de doenças inflamatórias crônicas. A proposta do presente projeto BEPE é a de avaliar o impacto de diferentes cepas de aEPEC, isoladas de crianças com diarreia, nos mecanismos associados à produção e secreção de mucinas. Para isso, avaliaremos os níveis de mucina formadora de gel e transmembrana em células caliciformes HT29-18-N2 após infecção bacteriana. Depois, examinaremos os níveis de cálcio intracelular, que está correlacionado com a função secretora de mucinas. Finalmente, serão detectadas as principais proteínas envolvidas em processos inflamatórios, citocinas, e reguladores de entrada de cálcio a partir dos conteúdos intracelulares. Esse conjunto de respostas fornecerão um ponto de partida para elucidar o fenômeno de hipersecreção induzido por cepas de aEPEC em modelo de alça ligada de coelho (estudo anterior do nosso grupo de pesquisa). Recentemente, por meio da capacitação de curta duração do programa Capes PrInt, foi realizado um estudo piloto em Barcelona testando o efeito de 7 cepas de aEPEC na produção e secreção de mucinas de células intestinais diferenciadas. Infelizmente, o tempo foi curto, e mais réplicas biológicas devem ser feitas para confirmar os nossos achados. Além disso, estamos no aguardo dos resultados de transcriptoma da interação bactéria-célula (objetivo da bolsa Capes_PrInt), que fornecerão dados relevantes para os objetivos contemplados no meu projeto de pesquisa pós-doutoral. O laboratório do Dr. Vivek Malhotra tem uma ampla experiência na identificação de proteínas potenciais envolvidas no processo de secreção de mucinas. As metodologias descritas no presente projeto estão padronizadas pelo grupo de pesquisa espanhol. Além disso, as cepas bacterianas já encontram-se armazenadas no laboratório do CRG e foram enviadas por meio de um acordo de transferência (MTA) assinado entre ambas as instituições.