Explorando os potenciais antimicrobianos da endolisina do bacteriófago contra cepas de Staphylococcus pseudintermedius resistentes à meticilina: uma nova estratégia bioterapêutica

• Processo: 25/07535-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2026
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: Ana Cristina Gales
• Beneficiário: Ikechukwu Benjamin Moses
• Supervisor: Roderick Slavcev
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Waterloo, Canadá
• Vinculado à bolsa: 24/01488-1 - Combatendo a emergência e disseminação de Staphylococcus pseudintermedius multirresistente em animais de companhia e sua transmissão zoonótica por terapia fágica: uma abordagem terapêutica alternativa, BP.PD
• Assunto(s): Clonagem
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Alternative biotherapeutic strategy | Bacteriophages | cloning | Endolysin | Genetic engineering | Methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius | Exploring bacteriophage endolysin as an alternative novel biotherapeutic agent against methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius

Resumo

Staphylococcus pseudintermedius, uma microbiota normal e um patógeno oportunista de cães de companhia, está se tornando cada vez mais um patógeno zoonótico desafiador e subestimado. Em cães de companhia, S. pseudintermedius, especialmente cepas multirresistentes, foram reconhecidas como agentes causadores de infecções de pele como piodermite canina, infecções de sítio cirúrgico e infecções do trato urinário. A situação epidemiológica é ainda mais exacerbada com relatos de sua transmissão zoonótica e infecções humanas, que têm sido principalmente atribuídas à crescente frequência de donos de cães e contatos próximos entre cães e humanos. A maioria dos relatos de infecções humanas devido a S. pseudintermedius são infecções de pele e tecidos moles (SSTIs), feridas por mordidas de cães, infecções pulmonares, infecções de articulações protéticas, infecções associadas a dispositivos, infecções da corrente sanguínea e infecções invasivas, especialmente entre pacientes hospitalizados que têm ou tiveram contato prévio com animais de companhia. É importante ressaltar que S. pseudintermedius resistente à meticilina (MRSP), geralmente multirresistente a medicamentos, surgiu com graves consequências para a saúde pública. Sabe-se que as MRSP são intrinsecamente resistentes à maioria dos beta-lactâmicos (penicilinas e seus derivados), pois possuem o gene mec do cromossomo cassete do estafilococo (SCCmec), um elemento genético móvel que abriga o gene mecA que codifica uma proteína de ligação à penicilina alternativa, a PBP2a. As características multirresistentes da MRSP a importantes antimicrobianos não beta-lactâmicos, como aminoglicosídeos, sulfonamidas, fluoroquinolonas, lincosamidas, macrolídeos, fenicóis e tetraciclinas, também foram bem documentadas; limitando e complicando ainda mais as opções de tratamento para infecções por MRSP. Devido à crescente ameaça global de resistência antimicrobiana diante do desenvolvimento decrescente de novos antimicrobianos, há uma necessidade urgente de desenvolvimento de estratégias terapêuticas alternativas para combater infecções bacterianas "difíceis de tratar". Uma dessas estratégias terapêuticas é o uso da endolisina, uma proteína codificada por bacteriófagos. A endolisina tem capacidade seletiva de degradar a camada de peptidoglicano bacteriano e romper a célula bacteriana; tornando-a, portanto, um agente bioterapêutico promissor. Em nosso estudo em andamento, foi identificada uma fase de leitura aberta homóloga aos genes que codificam endolisinas nos genomas de bacteriófagos de S. pseudintermedius. A fase de leitura aberta que codifica as enzimas hidrolisadoras de parede celular de endolisina será amplificada por reação em cadeia da polimerase e clonada em um vetor de expressão pET-21a. O produto gênico clonado será então superexpresso em E. coli, purificado e caracterizado quanto à estabilidade em temperatura, pH e salinidade. A atividade antibacteriana da endolisina caracterizada contra cepas patogênicas de S. pseudintermedius resistentes à meticilina (MRSP) recuperadas de cães e humanos será então avaliada para confirmar seu espectro de atividade lítica.