Geração de células iPSCs mediante reprogramação de fibroblastos da espécie Gorilla gorilla

• Processo: 25/11258-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Fabiana Fernandes Bressan
• Beneficiário: Kauã Weik Orneles de Freitas
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Assunto(s): Biotecnologia Reprogramação celular Células-tronco pluripotentes induzidas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biotecnologia | reprogramação celular | Células-tronco pluripotentes induzidas

Resumo

O gorila é o maior dentre o grupo dos primatas, e, com exceção do chimpanzé, é o parente mais próximo dos humanos.A proximidade genética permite que sejam realizados estudos evolutivos e adaptativos entender os genes relacionados a doenças, mecanismos de resistência a patógenos, desenvolvimento de terapias gênicas, além da possibilidade de uso em pesquisas translacionais, aplicações biomédicas e conservação da espécie que está classificada como "Criticamente Ameaçada" pela IUCN. Uma ferramenta eficiente nestes estudos é a produção de células-tronco pluripotentes induzidas (Induced Pluripotent Stem Cells, iPSCs) que podem ser geradas via metodologia integrativa, a qual resulta na inserção dos vetores no DNA da célula reprogramada, e não integrativa, em que os vetores chegam às células através de plasmídeos, tornando-as livres de transgenes. Porém, ainda não foi relatada a reprogramação epissomal a partir de fibroblastos na espécie gorila ocidental, decorrente da dificuldade em obtenção de material biológico para o estudo desta espécie. Nesta proposta, o objetivo é comparar a geração de iPSCs geradas por meio da reprogramação de fibroblastos previamente isolados de Gorilla gorilla através do método de reprogramação não integrativo, usando vetores epissomais (pMASTER 12 e pCXB EBNA1) e integrativo, utilizando vetor lentiviral com fatores de transcrição humanos OSKM (OCT4, SOX2, c-MYC e KLF4). Havendo a presença de colônias, estas serão caracterizadas a partir da morfologia, expressão gênica, formação de corpos embrióides, fosfatase alcalina e imunocitoquímica para fatores de pluripotência.