Expressão e purificação da protease NS2B-NS3 do Zika vírus visando estudos estruturais

• Processo: 25/17916-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2026
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2026
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Glaucius Oliva
• Beneficiário: Lorrana Lara Vieira
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/07600-3 - CIBFar - Centro de Inovação em Biodiversidade e Fármacos, AP.CEPID
• Assunto(s): Infecções por Arbovirus Cristalografia Flavivirus Peptídeo hidrolases Vírus Zika
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Arboviroses | Cristalografia | ensaios estruturais | flavivírus | protease | Zika | Biofísica

Resumo

O Zika vírus (ZIKV), um arbovírus do gênero Flavivírus, permanece uma ameaça à saúde pública global, devido à sua associação com graves complicações neurológicas e à ausência de antivirais específicos. A protease viral NS2B-NS3 é essencial para o processamento da poliproteína do ZIKV e representa um alvo promissor para o desenvolvimento de novos fármacos. Este projeto tem como objetivo a produção da protease NS2B-NS3 de ZIKV em alta pureza e rendimento, seguida da otimização de condições de cristalização para viabilizar estudos estruturais por difração de raios X. A construção utilizada, do tipo bicistrônica, permite a expressão independente de NS2B e NS3 e favorece o enovelamento correto do complexo proteico. A metodologia inclui expressão em E. coli, purificação por cromatografia de afinidade e exclusão molecular, avaliação da qualidade por SDS-PAGE e triagem de condições cristalográficas via difusão de vapor em sistema hanging-drop. A execução deste projeto permitirá o avanço no conhecimento estrutural sobre o ZIKV e contribuirá para a formação técnico-científica da estudante, inserindo-a em uma linha de pesquisa de grande relevância em saúde pública no país. (AU)